原因分析:电泳液陈旧;琼脂糖凝胶配置出现问题; 解决方法:重新配置电泳缓冲液,并及时更换新的电泳液;配置琼脂糖凝 胶应注意是否正确加入合适的TAE浓缩液,凝固时间应充足,凝胶尽量现配现用,切勿长时间配置后使用。 2. 条带偏移扭曲 不管是目的基因的条带还是Marker的条带都呈现弯曲,泳道发生偏移; 问题原因:琼脂糖凝...
聚丙烯酰胺凝胶电泳很快,可容纳相对大量的DNA,但制备和操作比琼脂糖凝胶困难。聚丙烯酰胺凝胶采用垂直装置进行电泳。目前,一般实验室多用琼脂糖水平平板凝胶电泳装置进行 DNA 电泳。琼脂糖主要在DNA制备电泳中作为一种固体支持基质,其密度取决于琼脂糖的浓度。在电场中,在中性pH下带负电荷的DNA向阳极迁移,其迁移率...
琼脂糖凝胶电泳DNA条带不够均匀的结果可能有以下几种原因:1. DNA样品浓度不均匀:如果在电泳前未对DNA样品进行浓度调整,或者混合物中的DNA样品浓度不同,就会导致电泳结果中的DNA条带出现不均匀。这可能是由于DNA提取或PCR扩增过程中的失败或误差导致的。2. DNA降解:DNA在制备和储存过程中容易受到酶...
具体出现为目的条带的上下出现不同程度的弥散,由中心向两端弥散。 原因分析:DNA发生降解;电泳缓冲液陈旧;电泳条件不合适;PCR自身原因,主要是非特异性的扩增;加样时操作不当,样品飘出样孔; 解决方法:DNA Maker进行对照,已校正是否为电泳体系的问题;使用特异性较高的引物;降低电泳时的上样量,并小心谨慎操作实验; ...
1.首先要排除琼脂糖凝胶配制的是否正确,如果齿孔不规则或残余凝胶颗粒则会使条带不规则;2.检查电泳槽的电极是否出现移位、歪斜;3.考虑更换电泳缓冲液;4.电压不要太高,否则凝胶会受热。此外,跑出漂亮的琼脂糖电泳照片我有2个经验供参考:1.琼脂糖凝胶配好后在在槽子里先空跑十几分钟然后断电...
原因:1. 胶配制的问题,制作不均匀或有污染或琼脂糖质量不好。 2. 电泳缓冲液过于老旧,考虑更换。 3. 电压太高,凝胶受热导致不均匀。 问题8:PCR产物与目的大小不符合 原因:1. 引物特异性不好。需重新设计引物 微信联系 :13456203271 老师跳进题海;让你跳出题海...
如果琼脂糖凝胶的浓度不够或者制备过程中出现了气泡,就会导致电泳条带不清晰。此外,如果琼脂糖凝胶的pH值不正确,也会影响电泳结果。 DNA样品的质量可能不够好。如果DNA样品的浓度过低或者存在杂质,就会导致电泳条带不清晰。此外,如果DNA样品没有经过充分的纯化和处理,也会影响电泳结果。 第三,电泳条件可能不够合适。
4)样品和缓冲液的相容性:PAGE和琼脂糖凝胶所用的电泳缓冲液体系可能不同,这也可能影响DNA的电泳行为...
3. 琼脂糖(1%):称1g琼脂糖,放入250 mL三角瓶内,加入100 mL 1×TAE电泳缓冲液,加热煮沸等其冷...