📖 准备DMSO储备溶液:将DCFH-DA溶解在DMSO中,制备成1-10mM的储备溶液。未使用的DMSO储备溶液应等分到单次使用的小瓶中,并储存在-20℃,避光保存。 💧 制备工作溶液:将DCFH-DA储备溶液稀释至1-10μM的工作浓度,根据经验确定最佳浓度。 🌿 孵育细胞:从生长培养基中取出细胞,加入工作溶液,并在室温或37℃下孵...
一、准备实验材料 1. dcfh-da荧光探针:这是一种常用的荧光探针,用于检测活性氧(ROS)的水平。实验前需要保证荧光探针的纯度和稳定性。 2. 细胞培养基:用于培养细胞,保证细胞的健康状况。 3. 细胞样本:需要提前培养好的细胞样本,确保细胞的密度和活性满足实验要求。 4. 无菌离心管、移液枪等实验用具:用于实验操作...
DCFH-DA检测法常用于检测细胞或组织中的过氧化氢(H2O2)、羟自由基(•OH)、超氧阴离子(O2•-)等活性氧物种。 DCFH-DA检测法的步骤如下: 1.细胞准备:将需要检测活性氧的细胞培养在合适的培养基中,保证细胞的活力和完整性。 2.DCFH-DA处理:将培养的细胞离心,去除培养基,并用含有适当浓度的DCFH-DA的PBS...
· 洗涤 ： 用无血清培养基洗涤细胞三次，彻底去除未进入细胞内的DCFH-DA。通常活性氧阳性对照在刺激细胞20-30分钟后可以显著提高活性氧水平。收集细胞后装载探针 · 稀释 ： 按照1:1000用无血清培养基稀释DCFH-DA，使终浓度为10 µM。· 细胞悬液 ： 细胞收集后悬浮于稀释好的DCFH-DA中，细胞浓度为1-2 ...
DCFH-DA(二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯)本身无荧光,可自由透过活细胞膜进入细胞内,并被细胞内的酯酶水解,形成DCFH,DCFH无荧光且不能通透细胞膜,从而被细胞内的活性氧氧化生成有荧光的DCF。根据活细胞中荧光的产生,可以判断细胞活性氧的含量和变化。 实验步骤 ...
DCFH-DA 活性氧ROS荧光探针 储备液配置: DCFH-DA 2,7-二氯荧光素二乙酸酯溶解性数据: DCFH-DA 的使用步骤: 1.盘子或板上的种子细胞,并在固定在37o的孵化器中孵化 C用95%的空气和5%CO2平衡。 2.丢弃培养基,并用HBS洗涤两次细胞。 3.向单元格添加适当的工作溶液。
DCF的荧光强度与活性氧物种的浓度成正比,因此可以通过测量DCF的荧光强度来间接测量活性氧物种的生成。 操作步骤: 1.将DCFH-DA溶解在适当的有机溶剂(如二甲基亚砜、乙酸乙酯等)中制备为一定浓度的工作溶液。 2.将细胞或组织样品均匀洒在培养皿或载玻片上。 3.向细胞或组织样品中加入适量的DCFH-DA工作溶液,使其...
【预期用途】本试剂盒用于精子活性氧类物质(ROS)DCFH-DA染色。【染色原理】DCFH-DA本身没有荧光,但可以自由穿越精子细胞膜。进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。DCFH不能通透细胞膜被标记到细胞内。在过氧化氢存在的条件下,DCFH被氧化生成荧光物质DCF,经48
活性氧检测试剂盒(Reactive oxygen species assay kit)是一种利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF...