DCFH-DA(2,7-二氯荧光啶)活性氧检测原理是通过活性氧破坏DCFH-DA,DCFH-DA分解成荧光细胞毒性产物亚甲基罗丹明B(DCF)。该量子事件可以被检测到,从而表明活性氧的存在。DCFH-DA活性氧检测是一种流式分析技术,它使用可见光来测量2,7-二氯荧光啶(DCFH-DA)荧光信号的强度,以非特异性地监测细胞或组织中的活性氧水...
DCFH-DA作为一种可渗透细胞的ROS染料,可以用于检测细胞内ROS的含量。其原理简单、操作方便,被广泛应用于细胞生物学、药理学、毒理学等领域。但是,在使用DCFH-DA时需要注意其优缺点,进行科学合理的实验设计和数据分析。
DCFH-DA检测ROS的原理主要基于其化学性质及与细胞内物质的一系列反应,具体如下: 1.细胞膜通透性与非荧光特性:DCFH-DA即二氯荧光黄双乙酸盐,本身不具有荧光特性,且为脂溶性物质,这使得它能够自由地穿透细胞膜,进入细胞内部。 2.细胞内水解反应:进入细胞后,DCFH-DA会被细胞内广泛存在的酯酶水解,脱去乙酰基,生成2'...
利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测是一种基于荧光强度变化,定量检测细胞内活性氧水平 的最常用方法,DCFH-DA 本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,被细胞内的酯酶水 解生成 DCFH,而 DCFH 不能通透细胞膜,从而使探针易于装载至细胞内,细胞内的活性氧可以氧化 无荧光的 DCFH 生成有荧光的 DCF,在最大激...
DCFH-DA(二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯)本身无荧光,可自由透过活细胞膜进入细胞内,并被细胞内的酯酶水解,形成DCFH,DCFH无荧光且不能通透细胞膜,从而被细胞内的活性氧氧化生成有荧光的DCF。根据活细胞中荧光的产生,可以判断细胞活性氧的含量和变化。 实验步骤 ...
DCFH-DA活性氧检测原理: 细胞摄取后,DCFH-DA被细胞酯酶脱乙酰化为非荧光化合物,随后被ROS氧化为 2'-7'二氯荧光素 (DCF)。 DCF是一种荧光化合物,可通过荧光计、流式细胞仪或荧光显微镜检测,其最大激发光谱和发射光谱分别为495 nm和529 nm。 DCFH-DA激发波长: ...
DCFH-DA(2',7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate)是一种专门用于检测细胞内活性氧(ROS,Reactive Oxygen Species)水平的荧光探针。它的工作原理非常有趣,让我们一起来看看吧!🌈 细胞摄取DCFH-DA 首先,DCFH-DA是一种脂溶性分子,能够轻松穿越细胞膜,进入细胞内部。一旦进入细胞,DCFH-DA会被细胞内的酯酶水解,去掉...
(2)不具有荧光:DCFH-DA在细胞内并不会自发发出荧光信号,而需要被ROS氧化后才会发出强烈的荧光信号。 (3)对活性氧敏感:DCFH-DA只有在存在ROS时才能够被氧化,因此可以作为活性氧指示剂来使用。 2. ROS的产生与检测 ROS包括超氧阴离子(O2•−)、过氧化氢(H2O2)、羟基自由基(•OH)等。这些ROS可以通过多种...
dcfhda荧光探针原理(一) 一、1.DCFH-DA探针简介 DCFH-DA,即2,7-二氯荧光素二乙酸酯,是一种广泛应用的荧光探针,主要用于细胞活性氧(ROS)的检测。DCFH-DA通过细胞膜进入细胞后,在细胞内酯酶的作用下水解,释放出荧光素二乙酸。荧光素二乙酸在细胞内进一步被还原为荧光素,在激发光的作用下发出荧光。DCFH-DA探针具...