下面介绍DCFH-DA活性氧检测的原理、操作步骤和应用。 原理: DCFH-DA分子是无色的,能够穿过细胞膜进入细胞内。一旦进入细胞内,DCFH-DA会被内源酯酶迅速水解成无色的2',7'-二氯荧光酮酮基(DCFH),该分子对氧自由基不敏感。当细胞内有活性氧物种存在时,这些活性氧物种(如超氧阴离子、过氧化氢等)会氧化DCFH为...
DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被标记到细胞内。在活性氧存在的条件下,DCFH被氧化生成荧光物质DCF,绿色荧光强度与细胞内活性氧水平成正比,检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。在激发波长502nm,发射波长530nm...
DCFH-DA(2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯)是一种常用的细胞活性氧(ROS)指示剂,具有细胞膜渗透性,本身无荧光,但进入细胞后能被细胞酯酶水解并氧化生成强荧光产物DCF,从而用于检测ROS的产生情况。 主要特点 细胞膜渗透性:易于渗透细胞膜,进入细胞内部。 无自发荧光:在细胞内不会自发发出荧光信号,避免了背景干扰。
本文将介绍dcfh-da荧光探针实验方法,包括准备实验材料、实验步骤、数据分析等内容。 一、准备实验材料 1. dcfh-da荧光探针:这是一种常用的荧光探针,用于检测活性氧(ROS)的水平。实验前需要保证荧光探针的纯度和稳定性。 2. 细胞培养基:用于培养细胞,保证细胞的健康状况。 3. 细胞样本:需要提前培养好的细胞样本,...
H2DCFDA(DCFH-DA)是一种通用的氧化应激指示剂。具细胞膜渗透性,本身无荧光。一旦进入细胞后,被细胞酯酶水解生成2',7'-二氯二氢荧光素(DCFH),之后被快速氧化生成强荧光产物2',7'-二氯荧光素(DCF),可用荧光光谱检测。适用于检测活性氧(ROS)和一氧化氮(·NO),以及确定总的氧化应激水平。普遍用来监测细胞氧化...
定义与原理 活性氧荧光探针(DCFH-DA)是一种通用的氧化应激指示剂,具有细胞膜渗透性。它本身无荧光,但一旦进入细胞后,会被细胞酯酶水解生成2",7"-二氯二氢荧光素(DCFH),之后被快速氧化生成强荧光产物2",7"-二氯荧光素(DCF)。通过荧光光谱检测DCF的荧光强度,可以间接反映细胞内活性氧(ROS)的水平。
一、DCFH-DA的原理 DCFH-DA是一种非极性分子,可以自由穿透细胞膜进入细胞内。在细胞内,DCFH-DA被酯酶水解成DCFH,DCFH可以被ROS氧化成DCF,DCF发出绿色荧光,荧光强度与ROS的浓度成正比。因此,DCFH-DA可以用于检测细胞内ROS的含量。 二、DCFH-DA的应用 DCFH-DA广泛应用于细胞生物学、药理学、毒理学等领域。在细胞生...
DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被标记到细胞内。在活性氧存在的条件下,DCFH被氧化生成荧光物质DCF,绿色荧光强度与细胞内活性氧水平成正比,检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。 在激发波长502 nm,发射波长530...
DCFH-DA 活性氧ROS荧光探针 储备液配置: DCFH-DA 2,7-二氯荧光素二乙酸酯溶解性数据: DCFH-DA 的使用步骤: 1.盘子或板上的种子细胞,并在固定在37o的孵化器中孵化 C用95%的空气和5%CO2平衡。 2.丢弃培养基,并用HBS洗涤两次细胞。 3.向单元格添加适当的工作溶液。