下面介绍DCFH-DA活性氧检测的原理、操作步骤和应用。 原理: DCFH-DA分子是无色的,能够穿过细胞膜进入细胞内。一旦进入细胞内,DCFH-DA会被内源酯酶迅速水解成无色的2',7'-二氯荧光酮酮基(DCFH),该分子对氧自由基不敏感。当细胞内有活性氧物种存在时,这些活性氧物种(如超氧阴离子、过氧化氢等)会氧化DCFH为...
原理基于DCFH-DA能够通过酯酶水解成DCFH,而DCFH可以直接或通过活性氧来氧化生成DCF。因此,DCF的荧光强度与细胞内的活性氧水平成正相关。DCFH-DA检测法常用于检测细胞或组织中的过氧化氢(H2O2)、羟自由基(•OH)、超氧阴离子(O2•-)等活性氧物种。 DCFH-DA检测法的步骤如下: 1.细胞准备:将需要检测活性氧的...
本文将介绍dcfh-da荧光探针实验方法,包括准备实验材料、实验步骤、数据分析等内容。 一、准备实验材料 1. dcfh-da荧光探针:这是一种常用的荧光探针,用于检测活性氧(ROS)的水平。实验前需要保证荧光探针的纯度和稳定性。 2. 细胞培养基:用于培养细胞,保证细胞的健康状况。 3. 细胞样本:需要提前培养好的细胞样本,...
DCFH-DA活性氧检测原理: 细胞摄取后,DCFH-DA 被细胞酯酶脱乙酰化为非荧光化合物,随后被 ROS 氧化为 2'-7'二氯荧光素 (DCF)。 DCF是一种荧光化合物,可通过荧光计、流式细胞仪或荧光显微镜检测,其最大激发光谱和发射光谱分别为495 nm和529 nm。 DCFH-DA激发波长: DCFH-DA的最大激发和吸收波长分别为:Ex/Em...
利用荧光探针DCFH-DA 进行活性氧检测是一种基于荧光强度变化,定量检测细胞内活性氧水平 的最常用方法,DCFH-DA 本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,被细胞内的酯酶水 解生成 DCFH,而 DCFH 不能通透细胞膜,从而使探针易于装载至细胞内,细胞内的活性氧可以氧化 无荧光的 DCFH 生成有荧光的 DCF,在最大...
DCFH-DA 活性氧ROS荧光探针 储备液配置: DCFH-DA 2,7-二氯荧光素二乙酸酯溶解性数据: DCFH-DA 的使用步骤: 1.盘子或板上的种子细胞,并在固定在37o的孵化器中孵化 C用95%的空气和5%CO2平衡。 2.丢弃培养基,并用HBS洗涤两次细胞。 3.向单元格添加适当的工作溶液。
DCFH-DA是一种非极性分子,可以自由穿透细胞膜进入细胞内。在细胞内,DCFH-DA被酯酶水解成DCFH,DCFH可以被ROS氧化成DCF,DCF发出绿色荧光,荧光强度与ROS的浓度成正比。因此,DCFH-DA可以用于检测细胞内ROS的含量。 二、DCFH-DA的应用 DCFH-DA广泛应用于细胞...
一、测定原理: 本试剂盒采用的DCFH-DA(2,7-Dichlorofuorescin Diacetate)探针,是迄今常用、灵敏的细胞内活性氧检测探针。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,当其进入细胞内后,会被细胞内的相关酯酶水解为DCFH(Dichlorofluorescin)。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被标记到细胞内。当细胞内有活性氧存在...
DCFH-DA（2'，7'-二（二羟甲基）荧光素）是一种荧光探针，可以用来检测细胞和组织中的活性氧（ROS）。活性氧是一类极其活跃的氧化剂，包括超氧阴离子（O2-）、羟自由基（·OH）、过氧化氢（H2O2）和一氧化氮（NO）等。活性氧在生理和病理状态下的水平变化与细胞的生命活动密切相关。
DCFH-DA活性氧检测原理和步骤 活性氧荧光探针(DCFH-DA),H2DCFDA,ROS荧光探针 2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯,2,7-Dichlorodihydrofluorescein diacetate,4091-99-0 描述: H2DCFDA(DCFH-DA)是一种通用的氧化应激指示剂。具细胞膜渗透性,本身无荧光。一旦进入细胞后,被细胞酯酶水解生成2',7'-二氯二氢荧光素(2...