所述方法包括步骤1:提取待测样本模板DNA;步骤2:对步骤1中提取的待测样本的模板DNA进行PCR扩增;步骤3:将步骤2中PCR扩增产物进行电泳确定;步骤4:对步骤3中确定后的PCR产物进行DNA序列测定.利用蚊科昆虫Cytb基因特异性引物,采用相应测序方法,快速准确得扩增出基因序列,为后续Cytb基因进行病媒生物蚊科昆虫的分子鉴定和...
[0013] 通过PCR反应,获得目的片段,纯化后送测序公司测序,由于mtDNA Cytb基因下游 结构复杂,反向引物无法测出,根据正向引物已测出的mtDNA Cytb基因序列设计一条测序 引物,进行引物步移(Primer walking)测序,让后将正向引物和步移引物测得两条序列进 行拼接,获得mtDNA Cytb基因全序列。[0014] Walking primer(SEQ ID ...
基于Cytb基因鉴别裸盖鱼的引物和探针,引物包括一对扩增引物,分别包括SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的核苷酸序列.探针包括SEQ ID No.3所示的核苷酸序列,5'端携带有荧光报告基团,3'端携带有荧光淬灭基团.本发明还提供鉴别裸盖鱼的方法和实时荧光PCR检测试剂盒,该方法和实时荧光PCR检测试剂盒基于上述引物和探针来...
步骤(1):基于所述裸盖鱼的Cytb基因设计并合成引物和探针; 步骤(2):从待检样品中提取DNA;以及 步骤(3):利用所述引物和所述探针,以所述DNA作为模板DNA,通过实时荧光PCR反应来鉴定所述裸盖鱼。 5.根据权利要求4所述的鉴别裸盖鱼的方法,其特征在于:在步骤(1)中,所述引物包括一对扩增引物,分别包括SEQ ID No...
本发明属于虾类种群识别领域,提供一对用于鉴别日本囊对虾地理群体的PCR扩增引物,分别具有L10945:5'-TGAGGAGGTTTCGCAGTA-3'或H11563:5'-AGATGAGGGTGAGTGGGT-3'的核苷酸序列;鉴别方法包括(1)利用所述的一对扩增引物对4个地理群体的待测样品的线粒体DNA中细胞色素b基因片段进行PCR扩增;(2)扩增产物纯化后测序,其中...
(2)在鸡mtDNA Cyt b基因基因上下游保守区域设计一对所述PCR引物(SEQ ID NO.1,SEQ ID NO.2);(3)利用测序引物(SEQ ID NO.3)对PCR产物进行测序;(4)对测序序列进行拼接.本发明的检测方法具有速度快,成本低,易掌握等优点,所获得的mtDNA Cytb基因全序列可以应用于鸡遗传资源多样性评估,母系起源,系统进化分析...
5'CCAATTCATGTTAGAAGA3',所述方法包括步骤1:提取待测样本模板DNA;步骤2:对步骤1中提取的待测样本的模板DNA进行PCR扩增;步骤3:将步骤2中PCR扩增产物进行电泳确定;步骤4:对步骤3中确定后的PCR产物进行DNA序列测定.利用白纹伊蚊Cytb基因特异性引物,采用相应测序方法,快速准确得扩增出目的基因序列,为有害生物的快速...
本发明属于虾类种群识别领域,提供一对用于鉴别日本囊对虾地理群体的PCR扩增引物,分别具有L10945:5'-TGAGGAGGTTTCGCAGTA-3'或H11563:5'-AGATGAGGGTGAGTGGGT-3'的核苷酸序列;鉴别方法包括(1)利用所述的一对扩增引物对4个地理群体的待测样品的线粒体DNA中细胞色素b基因片段进行PCR扩增;(2)扩增产物纯化后测序,其中...
(Cytb)基因特异性引物.方法 根据白纹伊蚊Cytb基因保守区域序列,设计1对引物,优化PCR扩增的退火温度.以白纹伊蚊及同属,同科,同目昆虫基因组DNA为样本,评价引物的特异性;以白纹伊蚊基因组DNA为样本,评价引物的灵敏性;扩增4个口岸捕获的8只白纹伊蚊,评价引物的重复性.结果 设计的引物的最佳退火温度为55℃.该引物...
鸡mtDNA Cytb基因全序列的扩增及测序用引物,见序列表SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3。扩增及其测序方法,包括以下步骤:(1)提取鸡羽毛中的DNA,并检测质量;(2)在鸡mtDNA Cyt b基因基因上下游保守区域设计一对所述PCR引物(SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2);(3)利用测序引物(SEQ ID NO.3)对PCR...