实施例4HRM-PCR检测CYP2C19rs4244285方法的建立和灵敏度检测一、待测样本的制备提取30例样本的血液基因组DNA,用作CYP2C19基因PCR扩增的模板。血液基因组DNA的提取步骤如下:(1)取1ml全血,加入3mlTE,颠倒混匀后静置10min,8000rpm离心5分钟,弃上清液;(2)重复上述步骤2-3次至沉淀为白色;(3)加入900ul10%SDS和10ul...
本发明合成包含CYP2C19rs4986893(c.636G>A)位点的野生型和纯合突变型DNA序列,利用基因重组技术将其克隆到pMD18-T载体中,构建出重组质粒pMD18-T-rs4986893的野生型和纯合突变型,并进行相应的PCR鉴定和测序鉴定,最后经定量作为待建立方法的标准品:野生型重组质粒为重组阴性质粒,纯合突变型重组质粒为重组阳性质粒,为下...