cvb3感染与多种疾病有关,如病毒性心肌炎、胰腺炎、脑膜炎等,其中以cvb3引起的病毒性心肌炎(ⅵral myocarditis,vmc)和胰腺炎最为常见,对人类的生命健康造成了巨大的威胁。 2、目前,已报道的传统的nancy毒株示踪病毒,感染性较弱,荧光表达较晚,示踪失踪较差,因此,提供一种具有更强感染性和更早荧光病毒表达,示踪效果...
3.病毒 柯萨奇病毒B3(CVB3)(Nancy株,本实验室提供),在HeLa细胞中传代。 4.实验动物: 雄性、4周龄、纯种近系Balb/c小鼠,批号:SCYl(沪2005.0002,平均体重: 13—169,由复旦大学实验动物科学部提供,均饲养于清洁级环境中。 二、方法 1.病毒准备: 毒种传代和繁殖方法: 待Hela细胞长成单层后,弃去培养液,用D....
进一步如上文所述的方法,其中所述cvb3病毒选自cvb3nancy、31-1-93、h3和pd的组,所述cvb3nancy、31-1-93、h3和pd全部特征在于在选自包括病毒衣壳蛋白1(vp1)中的氨基酸残基k78、a80、a91和i92的组的氨基酸序列中的至少一种或几种改变。进一步如上文所述的方法,其中所述cvb3病毒是cvb3pd-0或其经修饰的形式。
we had previously reported that the pBRCVB3 virus induces mainly pancreatitis, but its myocarditis-inducing ability was severely impaired11. Using this virus as the backbone, we sought to create attenuated mutant viruses that would lose their ability to induce both myocarditis and pancreatitis, thus ...
以柯萨奇病毒b3型nancy株dna作为模板,pcr扩增cvb3抗原vp1全长编码基因;将目的基因经hindiii和bamhi双酶切后与经同样双酶切的pet28a载体连接,获得编码cvb3vp1原核表达质粒pet28a-vp1; (2)构建编码abd-vp1蛋白疫苗的原核表达质粒 合成编码abd的全长基因,通过pcr方法扩增abd全长基因;以构建的pet28a-vp1质粒为载体,将...
1 材料和方法1.1 材料 真核表达质粒 pcDNA3/sVP1-C3d3、 CVB3VP1基因重组腺病毒 Ad/VP1和空腺病毒 Ad为本室前期构建, 大肠杆菌 DH5α、 HeLa细胞、 Sp2/0细胞、 柯萨奇病毒 B3型 Nancy株为本室保存, 腺病毒穿梭载体 pAdTrack-CMV、 骨架载体pAdEasy-1及 Bj5183菌株为河北医科大学解剖学教研室米立国教授...
目的:病毒性心肌炎发病机制尚未完全阐明,从分子水平进行研究是目前研究的热点,已发现一些基因异常表达与病毒性心肌炎的发生发展有关,但对全病程基因表达谱的研究较少,本研究探索病毒性心肌炎急性期心肌组织基因谱时空表达动力学变化特征.方法:Balb/c小鼠腹腔注射CVB3病毒(Nancy株)建立急性心肌炎实验模型,分别在实验当天...
目的 利用CMV启动子构建CVB3感染性克隆载体.方法 将质粒pcDNA3.1(+)的CMV启动子下游区域通过PCR技术替换成设计好的多克隆位点区,分别插入PCR合成的HdvRz核心序列和polyA尾 片段,形成框架载体pc-H-A,通过瞬时转染HeLa细胞初步鉴定pc-H-A的可用性;用本室保存的CVB3(nancy株)感染HeLa细胞,取感 染液上清提取病毒RNA,...
目的 利用CMV启动子构建CVB3感染性克隆载体.方法 将质粒pcDNA3.1(+)的CMV启动子下游区域通过PCR技术替换成设计好的多克隆位点区,分别插入PCR合成的HdvRz核心序列和polyA尾 片段,形成框架载体pc-H-A,通过瞬时转染HeLa细胞初步鉴定pc-H-A的可用性;用本室保存的CVB3(nancy株)感染HeLa细胞,取感 染液上清提取病毒RNA,利...
1材料与方法1.1细胞株、 菌株、 病毒株人宫颈癌细胞系 HeLa 细胞 人胚肾 293 细胞 大肠杆菌 BL2 DE3 pLysS CVB3 Nancy 株均为本室保存 .2质粒、 重组腺病毒及实验动物原核表达质粒 pET-his VP 和重组腺病毒 Ad vp 为本室前期构建 BALB c 纯系小鼠 雄性 4-6 周龄 购自河北医科大学实验动物中心 .3试剂...