CUT&Tag技术 的基本原理为: 在抗体引导下,ChiTag酶仅在目的组蛋白修饰标志、转录因子或染色质调控蛋白结合染色质的局部进行目的DNA的片段化,同时添加测序接头,并释放到细胞外。由于绝大部分无关的染色质还留在细胞核内,因此整个实验的信噪比大幅提高,同时简化了实验步骤。该方法可一管式高通量应用,并可与单细胞测序...
cut-tag技术原理 118302023-05-11 15:41:36未经作者授权,禁止转载 您当前的浏览器不支持 HTML5 播放器 请更换浏览器再试试哦~2 投币 1 4 利用连有刀豆蛋白A的磁珠结合细胞,并使用非离子去污剂洋地黄皂苷进行细胞膜通透。通过针对靶蛋白的一抗、相应二抗和Protein A/G的介导,使得与Protein A/G融合的转座子...
CUT&Tag是一种新的DNA—蛋白质互作研究方法。与传统的ChIP-Seq相比,CUT&Tag技术操作简便,无需免疫共沉淀和超声破碎;细胞起始量低。60-100000个细胞就可以满足需要,且CUT&Tag单细胞技术已经实现;一步完成建库,不需要传统的修复末端,加A,加接头构建文库;信噪比高。 CUT&Tag技术优势——特异性强,背景噪音较低;灵敏...
CUT&Tag全称Cleavage Under Target & Tagmentation,翻译为靶向剪切及转座酶技术,是一种研究蛋白-DNA互作的技术,替代传统的ChIP-seq方法。开头介绍ATAC-seq和CUT&Tag非常相似,原因就在于CUT&Tag也用Tn5转座酶,只不过这个酶是Protein A/G融合的Tn5转座酶。当然,两者研究内容还是不一样的,下面详细说一下。 2.1 背景介...
随着Multi-CUT&Tag试剂盒的推出,越来越多科研工作者咨询multi-CUT&Tag的一些相关问题,这里,我们来对Multi-CUT&Tag技术原理进行最全解析。 一、Multi-CUT&Tag实验流程及原理 实验原理:利用Con A磁珠捕获细胞并利用5% Digitonin对细胞膜进行穿孔,选择鼠源一...
R-loop CUT&Tag 流程 数据分析显示,R-loop CUT&Tag可以在全基因组水平富集R-loop信号,并且这些信号在RNase A和RNaseq H 处理后显著减少,说明检测到的R-loop信号具有真实性和特异性[4]。 将R-loop CUT&Tag结果和DRIP-seq以及其它R-loop检测技术(Map R,RChIP,DRIPc)结果进行对比,R-loop CUT&Tag表现出更...
Multi-CUT&Tag技术原理解析 Multi-CUT&Tag技术原理解析
CUT&Tag全称Cleavage Under Target & Tagmentation,翻译为靶向剪切及转座酶技术,是一种研究蛋白-DNA互作的技术,替代传统的ChIP-seq方法。开头介绍ATAC-seq和CUT&Tag非常相似,原因就在于CUT&Tag也用Tn5转座酶,只不过这个酶是Protein A/G融合的Tn5转座酶。当然,两者研究内容还是不一样的,下面详细说一下。
Multi-CUT&Tag实验流程及原理 实验原理:利用ConA磁珠捕获细胞并利用5% Digitonin对细胞膜进行穿孔,选择鼠源一抗和兔源一抗实现同一细胞双靶标研究,之后,鼠源一抗结合Anti-mouse Tn5、兔源一抗结合Anti-rabbit Tn5从而定向切割不同靶标靶向的目标蛋白结合DNA序列,再经过PCR完成二代测序文库的构建。对文库进行测序后的...