CUT&RUN的原理与ChIP相似,适用于研究组蛋白修饰、转录因子、染色质修饰酶以及其他DNA结合蛋白在基因组上的结合位点。关键区别在于,CUT&RUN通过抗体靶向和核酸酶原位切割,将目的蛋白结合的DNA从染色质上切割并释放出来。其主要步骤包括:1️⃣ 细胞通透化:首先将细胞通透化,以便抗体能够进入细胞内部。 2️⃣ 抗体...
对照和标准化是整个实验的关键步骤。阳性对照推荐使用H3K4me3或者H3K27me3,;阴性对照推荐使用Rabbit IgG。你还可以使用spike-in来进行标准化。 CUT&RUN有6种主要试剂。这里需要注意的是,根据你的实验材料是细胞、nuclei、或者固定的细胞,所使用的试剂是不一样的(这里试剂列表就不贴了,有需要的同学可以去试剂盒官网...
有的人是真热爱做实验! 实名赞美Steven Henikoff,是CUT&Tag和Cut&RUN实验方法的创始者,解决了少量样品中蛋白质结合DNA位点的检测。 图1,他们实验室在维护一个实验步骤的网站(链接)内关于这两个实验的流程,有问必答,回答极其迅速且耐心具体(亲测有效)。
典型的孔隙度和渗透率运行测试程序包括以下步骤: 1) 方向的核心插件削减从相干代表芯,其端部表面精确地面在铣床,其尺寸和重量衡量 ;2) 样品装入 Hoek 细胞,并应用所需围应力 (Sr) 和轴向应力 (Sa) ;3) 系统被通红实验气体 (氦用在这项研究) ;在样品池 (Ps) 4) 初始平衡压力设定和关闭阀 1 ;设置与 ...