5. PCR扩增条件:优化PCR扩增条件,以确保扩增效率和特异性。 6.文库构建和测序:按照建库试剂盒和测序平台的说明书进行操作,确保实验结果的准确性和可靠性。 CUT&Tag技术是一种高效、灵敏的蛋白质-DNA互作关系研究方法,但在实验过程中需要注意细节,以确保实验结果的准确性和可靠性。©...
在进行CUT&Tag实验时，首先将细胞与磁珠混合，然后进行靶蛋白特异性抗体（一抗）孵育，使抗体进入细胞与靶蛋白结合。为了放大信号，接着进行二抗孵育。最后孵育pAG-Tn5转座体，使得转座体进入细胞并与抗体结合，这样就把转座体间接的固定在靶蛋白上，随后加入Mg²⁺，激活Tn5酶的切割活性，打断靶蛋白结合的DNA区域。
5、快速、简化的程序: 从细胞到文库DNA的过程不到5小时。 6、非常方便:该试剂盒包含CUT&Tag原位测序每个步骤所需的所有组件,足以用于蛋白质/DNA捕获和捕获的DNA文库制备,从而使cTIP(CUT&Tag In-Place)测序试剂盒Z方便,结果可靠且一致。 CUT&Tag试剂盒反应图示: DNA-Target Protein-Antibody-ChipTag结合示意图...
在CUT&Tag实验前对细胞进行高浓度甲醛交联处理,固定与DNA结合力较弱或者结合具有高度动态性的DNA结合蛋白,如少量高效的转录因子、辅因子等;处理后再经过细胞透化,即可进入常规CUT&Tag实验流程。 该流程兼具ChIP-seq用甲醛交联可有效固定蛋白的优点和CUT&Tag技术细胞用量少、操作简单、信噪比高的优点,为转录因子、辅因...
CUT&Tag技术以其高灵敏度、低背景、简便快捷的操作流程在组蛋白修饰分析中占有一席之地。它特别适合于样本量有限的情况,并且能够提供高分辨率的数据。 珠海舒桐医疗科技有限公司推出的GeneRulor pA-Tn5 Transposome可以有效地进行CUT&Tag,同时公司还推出了CUT&Tag试剂盒,本CUT&Tag试剂盒相较于传统的ChIP-seq,优化了...
6、高度方便:试剂盒包含CUT&Tag就地测序的每个步骤所需的所有组分,这些组分足以进行蛋白/DNA捕获和捕获的DNA文库准备,从而使cTIP(CUT&Tag In-Place)测序试剂盒成为Z方便、可靠且结果一致的试剂盒。 CUT&Tag试剂盒检测原理: EpiNext™ cTIP(CUT&Tag In-Place)测序试剂盒包含了从哺乳动物细胞开始进行成功的cTIP-...
图5. 单细胞CUT&Tag测序流程(Henikoff,2019) Part III 翌圣CUT&Tag产品重磅上线 翌圣生物CUT&Tag试剂盒相较于传统的ChIP-seq,优化了反应体系和实验操作流程,文库时间更短(仅需7小时),起始样本要求更低,抗体投入量更少,文库产量更高等优点,是蛋白质-DNA互作研究技术的又一颠覆性创新。 1.更高的文库质量。
在CUT&Tag试剂盒转化过程中,翌圣生物开创性的在试剂盒中引入spike in,该技术已申请相关专利。 图:翌圣生物CUT&Tag技术申请专利 在CUT&Tag技术上,翌圣不断突破创新,2023年4月,翌圣推出Multi-CUT&Tag试剂盒,实现一份细胞,两个靶标的研究。在节省样本的同时,也节省时间和试剂。
针对CUT&Tag打断产物DNA提取过程中小片段丢失的问题,本试剂盒提供优化的Tagment DNA Extract Beads,相较于常规的片段分选磁珠可以完整的回收CUT&Tag产物中的小片段DNA,大大简化了酚氯仿-乙醇沉淀法的繁琐操作。此外,本试剂盒还提供了阳性抗体H3K4me3(兔抗)以及相应的二抗(羊抗兔IgG),用于阳性对照实验(仅24T规格提供阳...