冷冻电镜断层成像(Cryo-ET)是一种从样品中重建三维信息的技术。与单颗粒技术SPA不同,这种技术通常在较大的样品、病毒或细菌等分离粒子或真核细胞上进行。Cryo-ET的力量在于可以实现一系列分辨率的细胞超微结构重构,因此它弥补了细胞和分子结构分辨率之间的差距。 冷冻的样品通过倾斜一系列角度,因此可捕捉到一系列的二维...
Cryo-ET仍旧处于蓬勃发展的阶段,在我赴普林斯顿任教前的几个月,成功帮清华引进了年轻的Cryo-ET专家李赛博士。过去三年,我也一直在努力帮普林斯顿大学招聘cryo-ET方面的人才,现在却依然是进行时,因为这个领域的人才确实是凤毛麟角。《返朴》邀请李赛博士撰稿,简要介绍cryo-ET的原理和发展,以飨读者。——颜宁 撰...
但是cryo-EM和其他材料电镜不同的是,我们希望能够移动和倾斜样品。因此我们需要个sample stage,而且必须非常精确。 可以在三维(XYZ)方向移动。需要非常精确,尤其是Z方向的移动关系到focus; 能够进行Tilt(cryo-ET常用),具有测角器(goniometer)。而且需要保证on-axis rotation; 在液氮温度下运行,收集高分辨率数据时其...
基于单颗粒冷冻电子显微镜(cryo-EM)分析,已经解析了优于4 Å的高分辨结构3,但由于电镜样品由蛋白纯化获得,因此并不能保证完全保持完整的结构;另一方面,使用冷冻电子断层扫描(cryo-ET)直接观察哺乳动物精子中的大分子复合物4,得到的重...
因此,科学家们首先需要将细胞或其他生物样本迅速冷冻在极低温下,固定它们在那一刻的状态,然后才能进行冷冻电镜下的观察。这也解释了冷冻电子显微镜成像(cryo-electron microscopy,简称为cryo-EM)中“冷冻”(cryogenic,简写为cryo-)一词的含义。 除了需要冷冻外,生物样品在冷冻电镜领域的应用还受到另一个重要限制,即样...
冷冻电子断层扫描(CryoET)是一种无标记的冷冻成像技术,能以纳米分辨率提供细胞环境的 3D 快照。用冷冻...
通过cryo-EM和单颗粒解析的多种无囊膜病毒结构 蓬勃发展的cryo-ET技术及原位结构生物学 原位结构生物学的目标是将超大蛋白质机器从生物膜、病毒、细胞、甚至组织环境中直接解析,以获得其在体结构、与核酸/生物膜的互作关系及分布信息。原位结构生物学核心技术是cryo-ET:它是将置于透射电镜样品台上的冷冻样品沿固定轴...
Cryo-ET和Cryo-EM的重构模型对比 结果显示,腔环包括八个蝶形亚基,每个包含两个对称翼。 每个翼由4个细长的管状体组成。在腔环亚基内,8个原体形成了两个结构域,其中一个为Finger结构域,该结构与直接接触在内部核细胞膜(INM)和外部核细胞膜(ONM)间的融合处;另一个为Grid结构域,它是Finger结构域的坚实基础。
加州理工学院的Grant J. Jensen教授的冷冻电镜(cryo-EM)入门系列课程 共48课 为电镜初学者提供了很好的入门学习,每课进行双语翻译上传 对于冷冻电镜感兴趣的,欢迎收藏点赞投币,支持三连!翻译不易,还请多多支持! 译者:陈昊
该研究利用cryo-ET及新开发的亚断层结构分析 (Sub-tomogram analysis) 方法,在极高分辨率水平 (3.5 Å ) 上首次解析了肺炎支原体 (Mycoplasma pneumoniae) 细胞内翻译延伸全过程的结构基础,以及不同抗生素对细胞内翻译过程的影响。首先,该研究利用肺炎支原体作为已知最小的细胞,在不进行样品减薄的情况下收集了...