CRISPR–Cpf1 敲除系统是 Cpf1–crRNA 复合体,利用 crRNA 引导 Cpf1 结合到靶 DNA 的特定序列上并切割双链 DNA 分子。利用此系统在基因特定部位切割,再通过同源重组作用去除靶基因,进一步利用质粒自身的温敏特性将质粒消除,从而完成基因敲除。为研究精氨酸代谢调控因子基因(argR 基因)对精氨酸代谢的影响,科研人员利...
首先通过连续转化Cpf1和CRISPR RNA (crRNA)表达质粒实现基因编辑。设计crRNA插入到pcrF11中,将同源臂和crRNA转化到含Cpf1的菌株中并诱导表达。选择非必需蛋白酶基因aprE、epr、nprE、bpr、mpr和nprB进行多重基因编辑系统验证。使用pHT‐XC和pcrF11‐1C‐DEL敲除单个基因,crRNA靶向aprE和同源臂。然而,将含有靶向epr...
作为CRISPR/Cas9系统的一种潜在的对手,CRISPR-Cpf1系统是一类新型的CRISPR-Cas系统,作为基因编辑的新工具,它进一步扩大了基因编辑靶位点的选择范围,同时几乎没有脱靶效应,已广泛引起人们的关注。 与过去的CRISPR/Cas9基因编辑系统相比,新的CRISPR/Cpf1基因编辑系统拥有五...
CRISPR-Cpf1也能在crRNA的引导下在人类细胞中剪切目标DNA,被称为是新一代的CRISPR基因组编辑系统。今年张锋研究组在多篇发表于Nature Biotechnology 上的文章中详细介绍了这种新系统。(Engineered Cpf1 variants with altered PAM specificities;Multiplex gene ...
然而,目前得到广泛应用的CRISPR/Cas9系统经常会发生脱靶效应,导致科学家们不想要的结果。作为CRISPR/Cas9系统的一种潜在的对手,CRISPR-Cpf1系统是一类新型的CRISPR-Cas系统,作为基因编辑的新工具,它进一步扩大了基因编辑靶位点的选择范围,同时几乎没有脱靶效应,已广泛引起人们的关注。
然而,目前得到广泛应用的CRISPR/Cas9系统经常会发生脱靶效应,导致科学家们不想要的结果。作为CRISPR/Cas9系统的一种潜在的对手,CRISPR-Cpf1系统是一类新型的CRISPR-Cas系统,作为基因编辑的新工具,它进一步扩大了基因编辑靶位点的选择范围,同时几乎没有脱靶效应,已广泛引起人们的关注。
CRISPR-Cpf1系统已成功应用于哺乳动物,植物,细菌等多种生物体的基因组编辑。此外CRISPR-Cpf1非常适合多重基因编辑。 然而,CRISPR-Cpf1系统的靶标效率在不同的gRNA序列之间差异较大。 2019年01月07发表在Bioinformatics上的“CRISPR-DT: designing gRNAs for the CRISPR-Cpf1 system with improved target efficiency ...
然而,目前得到广泛应用的CRISPR/Cas9系统经常会发生脱靶效应,导致科学家们不想要的结果。作为CRISPR/Cas9系统的一种潜在的对手,CRISPR-Cpf1系统是一类新型的CRISPR-Cas系统,作为基因编辑的新工具,它进一步扩大了基因编辑靶位点的选择范围,同时几乎没有脱靶效应,已广泛引起人们的关注。
北京泽平代理的进口IDT(Integrated DNA Technologies)Alt-R™ CRISPR-Cas12a(Cpf1)基因编辑系统,提供CRISPR-Cas12a(Cpf1)中crRNA(CRISPR-derived RNA)的化学合成定制服务,并生产商品化通用型重组Cas12a核酸酶(Cas12a nuclease,即Cpf1核酸酶,限制性内切酶,基因组DNA双链剪切)、以及增强RNP(ribonucleoprotein,核糖核蛋...
既然cpf1具有这种自我加工的能力那也就没必要用多个启动子来驱动crrna表达或者添加一些方便加工的序列如csy4切割位点 如何利用CRISPRCpf1系统实现多重基因编辑 CRISPR基因组编辑领域可谓日新月异,每月都有新成果涌现。不久前,CRISPR技术先驱张锋(Feng Zhang)领导的团队发表文章,介绍了如何使用Cpf1来进行多重的基因组...