CRISPR/Cas9系统能利用一段小RNA来引导识别靶序列,并用核酸内切酶剪切DNA以降解外来遗传物质。只需要通过改变这段引导RNA,就可以使CRISPR/Cas9定位到新的DNA序列上。该技术用CRISPR/Cas9构建针对特异基因片段的载体,比原有的ZFNS和TALENS手段更为简便、易操作,大大降低了基因组编辑技术的门槛,已经应用于人、小鼠、大鼠...
2022年8月3日,韩国庆尚大学植物分子生物学和生物技术研究中心Jae-Yean Kim课题组在Plant Communications在线发表了题为Engineering drought and salinity tolerance traits in crops through CRISPR-mediated genome editing: Targets, tools, ch...
重复的微卫星序列位于苹果 × 家转录因子 MYB10基因上游,导致红色果实呈杂合状态,是我们的样本来证明这种方法的有效性: 它包含一个长结构变异的基因组区域,通常被短读测序技术忽略的导向 rna 的切割特异性用聚合酶链式反应产品证明,然后用它们指定切割高分子量的苹果 DNA。 随后用 ONT MinION 流动细胞(r. 9.4.1)...
组合突变体筛选具有常规产生更高阶突变体集合并促进基因网络表征的潜力。 Mapping and characterization of plant gene regulatory networks using CRISPR screens 综上,通过将该方法与过去二十年中产生的大量基因组图谱相结合,CRISPR 筛选技术的实现为更深层次的解析植物基因组提供了新的机遇,并将推动功能和合成生物学的...
2024年11月1日,Plant Biotechnology Journal在线发表了宜春学院刘晓龙课题组题为“CRISPR/Cas knockout of the NADPH oxidase gene OsRbohB reduces ROS overaccumulation and enhances heat stress tolerance in rice”的研究论文。 基于以上研究基础,研究人员利用CRISPR/Cas9技术敲除水稻 OsRbohB基因,获得了 OsRbohB-KO...
基因组编辑技术是用特殊的核酸酶对基因组进行精准修饰的一种新兴技术.2013年研究人员发现了CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)系统,将其中的CRISPR/Cas9系统成功改造成RNA引导的核酸内切酶,发展了CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术.该技术能够对包括植物在内的几乎所有物种的基因组进行高效,精准...
Plant J:Pooled CRISPR/Cas9 揭示质体磷酸甘油酸激酶在光合碳固定和代谢中的冗余作用 2019年3月,福建农林大学关跃峰课题组在 The Plant Journal 上在线发表题为“Pooled CRISPR/Cas9 揭示质体磷酸甘油酸激酶在光合碳固定和代谢中的冗余作用”的研究论文。 磷酸甘油酸激酶(phosphoglycerate kinase,PGK)是一种参与糖酵...
2021年1月23日,Plant Journal 在线发表了西班牙分子生物学和植物细胞研究所 José‐Antonio Daròs团队的题为Efficient Cas9 multiplex editing using unspaced sgRNA arrays engineering in a Potato virus X vector的技术类研究工作。利用马铃薯X病毒载体实现了非间隔sgRNA序列靶向的高效的Cas9多重编辑。
近日,Molecular Plant杂志以背靠背形式分别在线发表了百格基因研究团队和遗传所李家洋及高彩霞研究团队利用 CRISPR/Cas9方法创制水稻突变体库的研究内容,该研究不仅对水稻功能基因组研究及遗传育种具有里程碑式的意义,也为植物遗传育种提供了新方法。 突变体是研究植物遗传、基因定位、分子克隆、基因表达与功能的良好实验材料...
“NGG"限制的方法:采用植物偏好的密码子优化Cas9酶,或者解析Cas9蛋白结构,并对酶本身进行改造,使其只能识别所有核苷酸都完全匹配的靶位点,提高其特异性:针对多倍体作物或者多基因控制的性状,设计能同时突变多个靶标基因的sgRNA;甚至可能构建在不同物种中通用的Cas9与sgRNA导入与表达系统、更有效地激活同源重组修复等;...