为了解决这个问题，我们使用了全基因组CRISPR-Cas9筛选方法寻找治疗AML最有效的靶点。研究过程 构建了全基因组 CRISPR Screen 文库（靶向19,050个蛋白编码基因及1864 microRNA前体基因的123，411个sgRNAs），转染 THP1 AML 细胞系进行全基因组 CRISPR 筛选（通过MOCK及OG-86 (LSD1 抑制剂：Oryzon Genomics, compound...
抗癌药物的研发也因为对这些靶点的性能和分子特性认识不足而阻力重重 【2】。 CRISPR-Cas9 基因编辑技术在生命科学领域已经得到了广泛的应用。单引导RNA(sgRNA, single-guide RNA)是由一小段自主设计的crRNA序列与tracrRNA序列支架融合得到的一个单个RNA分子。基于sgRNA库的CRISPR-Cas9筛选系统可以帮助我们了解到基因的...
为了解决这个问题,我们使用了全基因组CRISPR-Cas9筛选方法寻找治疗AML最有效的靶点。 研究过程构建了全基因组 CRISPR Screen 文库(靶向19,050个蛋白编码基因及1864 microRNA前体基因的123,411个sgRNAs),转染 THP1 AML 细胞系进行全基因组 CRISPR 筛选(通过MOCK及OG-86 (LSD1 抑制剂:Oryzon Genomics, compound 86)...
为了解决这个问题,我们使用了全基因组CRISPR-Cas9筛选方法寻找治疗AML最有效的靶点。 研究过程构建了全基因组 CRISPR Screen 文库(靶向19,050个蛋白编码基因及1864 microRNA前体基因的123,411个sgRNAs),转染 THP1 AML 细胞系进行全基因组 CRISPR 筛选(通过MOCK及OG-86 (LSD1 抑制剂:Oryzon Genomics, compound 86)...
我们可以利用CRISPR/Cas9技术直接在目标细胞系上敲除或敲入离子通道，进行细胞层面实验。特别是一些需要长时程检测离子通道活性的实验，离子通道敲除细胞系更能成为比较理想的实验材料。若采用动物模型，我们需要对离体组织进行离子通道的活性检测，即使将生命力较为顽强的脑组织放入维持液中，其理想的检测窗口也只能延长到4...
利用CRISPR-Cas9技术建立与某类功能相关的突变体亚库或者全基因组的突变体库,利用慢病毒载体大规模导入构建好的sgRNA亚库或者全库,能够同时靶向成百上千个基因,实现高通量的功能基因筛选。 吉凯基因的特色CRISPR自平衡文库(吉凯专利)一个样品就可以达到文库碱基平衡(一般建库方法需要多样品混样达到碱基平衡),确保不浪费...
CRISPR/Cas9基因编辑使大量生物医学实验成为可能,包括系统地关闭癌细胞中的基因以寻找癌细胞生存和生长严重依赖的基因的研究。这些基因,或“癌症依赖性”,通常是有希望的药物靶点。但是新的研究表明,许多这些CRISPR筛选实验依赖于被称为CRISPR/Cas9向导的成分,这些成分在来自所有祖先的细胞中表现不佳,这可能导致CRISPR筛选...
利用体内CRISPR-Cas9筛选技术敲除基因及通过靶点的抑制剂来验证。 研究总体流程图:上. 从急性淋巴细胞白血病患儿体内取得肿瘤细胞,植入NGS小鼠体内构建PDX模型,并模拟临床的多化疗药物联合方案给小鼠模型进行长达4个月的用药,期间监测肿瘤生长情况,最终获得...
通过CRISPR/Cas9进行基因组范围内的基因敲除筛选，可以发现与某种生物过程或疾病相关的关键基因。这种技术在药物靶点发现和功能基因组学研究中尤为重要。6. 农业应用：CRISPR/Cas9可以用于改良作物和家畜的基因，提升作物产量、抗病性和环境适应性。例如，利用CRISPR技术增强作物的抗旱性或提高作物营养价值。7. 基因治疗：...
图1 基于CRISPR/Cas9技术在全基因组范围内筛选肿瘤转移驱动因子图2 总机制图总的来说，本研究表明，MEST表达失调是食管癌转移的重要事件，揭示了MEST作为肿瘤转移潜在驱动因素的作用机制。这些发现为肿瘤转移的分子机制提供新的见解，将有助于建立食管癌新的预后生物标志物和治疗策略。广州医科大学附属第五医院李斌教授...