RISPR-Cas9系统基本工作原理涵盖了一系列分子事件，从CRISPR序列适应外源DNA片段，通过转录和加工生成成熟的CRISPR RNA（crRNA）或合成单导RNA（sgRNA），到sgRNA与Cas9蛋白的复合形成。该复合物通过sgRNA的spacer序列导引Cas9蛋白高度特异性地结合至目标DNA，触发Cas9的内切酶活性，引发目标DNA的双链断裂。细胞察觉到断裂后...
CRISPR-Cas9系统基本工作原理涵盖了一系列分子事件,从CRISPR序列适应外源DNA片段,通过转录和加工生成成熟的CRISPR RNA(crRNA)或合成单导RNA(sgRNA),到sgRNA与Cas9蛋白的复合形成。 该复合物通过sgRNA的spacer序列导引Cas9蛋白高度特异性地结合至目标DNA,触发Cas9的内切酶活性,引发目标DNA的双链断裂。 细胞察觉到断裂后,启...
基本工作原理涵盖了一系列分子事件,从CRISPR序列适应外源DNA片段,通过转录和加工生成成熟的CRISPR RNA(crRNA)或合成单导RNA(sgRNA),到sgRNA与Cas9蛋白的复合形成。 该复合物通过sgRNA的spacer序列导引Cas9蛋白高度特异性地结合至目标DNA,触发Cas9的内切酶活性,引发目标DNA的双链断裂。 细胞察觉到断裂后,启动修复机制,包括...
pLentiCRISPR cas9 v.2质粒DNA 价 格 ￥990 起批量 ≥1盒 最小起订1盒 供货总量999盒 发货地址湖北省武汉市 建议售价￥990/盒 更新日期 2025年05月24日 产品规格2ug 即时洽谈 立即询价 查看联系方式 收藏产品 发送留言 举报 VIP2年 湖北艾普蒂生物工程有限公司 企业认证: 备 营业执照和法人身...
该复合物通过sgRNA的spacer序列导引Cas9蛋白高度特异性地结合至目标DNA,触发Cas9的内切酶活性,引发目标DNA的双链断裂。 细胞察觉到断裂后,启动修复机制,包括非同源末端连接和同源重组,以实现基因组的精准编辑,为疾病治疗和基因研究提供了创新性工具。 一、sgRNA的设计原则 ...
大家好!今天我们来聊聊如何构建CRISPR/Cas9质粒。首先,我们选择了一个名为Lenti-v2的质粒作为backbone,这是张峰老师实验室开发的。构建方法采用的是同源重组技术,具体步骤可以参考之前的笔记哦。酶切位点的选择是关键,我们使用了BsmBI-v2酶,它的反应温度是55℃。这个酶有两个切割位点,分别位于U6 promoter和gRNA scaff...
本研究设计了一种简单有效的双质粒CRISPER/Cas9技术,可用于红色毛癣菌的pacC基因编辑。实验证明突变体的基因破坏频率较高(约34-37%),且在酸性和碱性pH下pacC转录水平均降低,并表现出与pH适应相关的几种形态异常。 END 翻译|邓睿歆(北京大学第一...
OneShine™C..一、原理Lenti-CRISPR V2质粒图谱如上所示。gRNA与Cas9蛋白结合于同一个载体上。我们设计合成了12万个gRNA(靶向约2万个基因),分别连接到Lenti-CRISPR V2载体上,然
下面小编就介绍下 lentiCRISPRv2 质粒的构建经验与心得。 01 首先要根据找到的 sgRNA 订购 oligo 以下为目的基因 sgRNA 引物合成序列。sgRNA 引物设计请参考「5 分钟学会 cas9 基因敲除——原来设计方案如此简单」 02 lentiCRISPRv2 构建方法 1.lentiCRISPRv2 载体线性化。