由肝细胞产生的外泌体具有靶向肝脏的能力,这是由于其同源组织靶向能力,并且具有将CRISPR-Cas9 RNP在体内递送进行治疗性肝组织基因编辑的潜力。 外泌体递送CRISPR-Cas9 RNP用于肝脏靶向的疾病治疗 浙江大学刘祥瑞、平渊和周天华课题组合作在Science Advances杂志上发表文章,报道了外泌体递送CRISPR-Cas9 RNP用于肝脏靶向的...
在CRISPR-Cas9系统中,利用Cas9和化学合成sgRNA形成的核糖核蛋白(RNP)替代传统的质粒、慢病毒转染模式,具有简单快捷、脱靶效应低、编辑效率高、转染效率高,无细胞毒性,无DNA干扰等优势,逐渐成为基因编辑基础科研实验的绝佳选择。如图3所示: △图3.RNP转染 【1】 Song G, Jia M, Chen K, et al. ScienceDirect CR...
针对传统质粒体系CRISPR/Cas9的诸多挑战，纯蛋白CRISPR/Cas9技术崭露头角。该技术仅由Cas9核酸内切酶与sgRNA两部分组成，经过体外简单组装成RNP后即可进行转导。此方法不仅操作简便、脱靶率低，还能显著提升基因编辑效率并降低细胞毒性，成为CRISPR/Cas9实验的理想选择。除了提供多种高效且易于操作的Cas9核酸内切酶，如Cas9双...
这些结果表明,在两个条件下,RNP复合物已经形成,而游离Cas9仍然存在。当等摩尔比(RNP 1/1)或dgRNA rEphx2过量(RNP 1/2, 1/3和1/5)时,只观察到一个热变性峰(TmRNP RNP 1/1 = 49.7℃;TmRNP RNP 1/2 = 49.9℃;TmRNP RNP 1/3 = 49.8℃;TmRNP RNP 1/5 = 49.7℃),这些Tm之间差异不显著。此外...
iGeoCas9 RNP-LNPs有效编辑小鼠的肝脏和肺部 04 展望 这项研究的重要性在于,它不仅提高了CRISPR-Cas9系统的基因编辑效率,还开发了一种新的、高效的递送系统,使得基因编辑技术在临床上的应用更加接近现实。通过调整LNP的配方,科学家们可以精确地将基因编辑工具递送到特定的器官和细胞类型中,这对于治疗遗传性疾病、癌症...
浙江大学刘祥瑞、平渊和周天华课题组合作在Science Advances杂志上发表文章,报道了外泌体递送CRISPR-Cas9 RNP用于肝脏靶向的疾病治疗研究成果。该研究开发了一种方法,可以将Cas9 RNP装载到肝星状细胞(HSCs; LX-2)的外泌体中,用于治疗不同的肝脏疾病。...
Cas9 RNPs是通过将纯化的Cas9与体外sgRNA和核糖核蛋白(RNPs)融合形成的复合物进入细胞后立即起作用。然而,RNP由于其复杂的组成和电荷特性而相对难以递送到细胞中,而蛋白质和核酸通常使用电穿孔与细胞穿透肽的辅助。随着递送载体的不断创新,科学家们已经确定外泌体是递送...
这里描述的模块化策略通过系统性递送RNP为组织特异性基因编辑提供了一种通用的方法。在经典的LNP配方中加入永久性阳离子脂质有助于使用中性缓冲液封装Cas9 RNP,从而保护和保存Cas9的功能。通过调节分子组成和比例,实现了全身注射后小鼠肝和肺组织特异性基因的选择性编辑。令人兴奋的是,肺靶向5A2-DOT-50 LNPs具有很高...
【CRISPR系列第十二期】RNP递送对比Cas9质粒转染的优势, 视频播放量 1、弹幕量 0、点赞数 0、投硬币枚数 0、收藏人数 0、转发人数 0, 视频作者 IDT埃德特, 作者简介 IDT埃德特致力于面向生命科学界开发、生产并销售核酸产品,为学术与商业研究、农业、医疗诊断和药物开发等
目前，基于LNP的RNP递送所面临的蛋白质变体问题，可以通过采用耐热的CRISPR酶来解决。相较于常用的编辑器，如化脓性链球菌Cas9（SpyCas9，Streptococcus pyogenes）或Lachnospiraceae细菌ND2006 Cas12a（LbCas12a，Lachnospiriceae bacterium ND2006 Cas12a），GeoCas9的Cas9 RNP展现出更高的热稳定性和负电荷密度，从而...