也有研究将腺相关病毒6(adeno-associated virus 6, AAV6)与Cas9核糖核酸蛋白相结合,检测到CRISPR在囊性纤维化(cystic fibrosis, CF)患者细胞中的编辑效率>28%,为今后安全有效体内递送治疗提供了希望[31]。 2.3 电穿孔 为了实现更...
在这项研究中,研究人员使用LONZA 4D-Nucleofector对β-地贫来源CD34+ HSPC进行电穿孔,然后利用AAV6作为载体将IDT公司的Cas9结合化学合成的sgRNA递送至HSPC进行基因编辑,在保持高度同源HBA2基因的同时,将内源性HBA1基因敲除并替换成全长HBB基因。 研究结果显示:该基因编辑策略使得β-球蛋白:α-球蛋白信使RNA和蛋白质比...
在这项最新研究中，研究团队利用CRISPR/Cas9基因编辑技术来定位并“剪切”有缺陷的CTLA-4基因。然后，研究人员使用腺相关病毒载体（AAV6）递送修正过的CTLA-4 的cDNA序列，通过同源重组修复（HDR）的细胞DNA修复机制将其“粘贴”到特定位置。用CRISPR-Cas9靶向CTLA-4突变位点并将其修复 这使得研究人员能够保存CTLA-4...
在这篇文章中,研究人员利用CRISPR-Cas9基因编辑技术来定位并“剪切”有缺陷的CTLA-4基因,将正确的CTLA-4的cDNA插入到原代人类T细胞的CTLA-4基因组位点的第一个内含子,在体外成功恢复了人类CD4 T细胞的表面CTLA-4表达和功能。随后研究人员使用AAV6向小鼠体内递送修正过的CTLA-4的cDNA序列,成功通过同源重组修复(HDR)...
在这项研究中,研究人员使用LONZA 4D-Nucleofector对β-地贫来源CD34+ HSPC进行电穿孔,然后利用AAV6作为载体将IDT公司的Cas9结合化学合成的sgRNA递送至HSPC进行基因编辑,在保持高度同源HBA2基因的同时,将内源性HBA1基因敲除并替换成全长HBB基因。 研究结果显示:该基因编辑策略使得β-球蛋白:α-球蛋白信使RNA和蛋白质比...
在HIV-ADA感染后,用主流抗HIV药物卡博替拉韦(CAB)、拉米夫定(3TC)、阿巴卡韦(ABC)和天然利匹韦林(RPV)进行抗逆转录病毒治疗,以抑制病毒复制,然后给予AAV6/CRISP-Cas9,敲除CCR5减缓病毒传播,最后通过AAV9/CRISPR-Cas9靶向敲除前病毒DNA片段,方案如图2A。结果表明在所有ART治疗的小鼠中观察到CD4+T细胞数量的恢复,在...
AAV/EV可以通过在其表面包含靶向肽以更选择性地递送基因。AAV/EV载体可以通过血脑屏障并有效地转导神经细胞。不同血清型的AAV，包括AAV1、AAV6和AAV9，已分别用于将转基因靶向递送至耳蜗和前庭毛细胞、神经元和少突胶质细胞。将EVs和病毒载体的力量和潜力结合在一起，有望在基因递送领域，特别是CRISPR/Cas递送...
在这项最新研究中,研究团队利用CRISPR/Cas9基因编辑技术来定位并“剪切”有缺陷的CTLA-4基因。然后,研究人员使用腺相关病毒载体(AAV6)递送修正过的CTLA-4 的cDNA序列,通过同源重组修复(HDR)的细胞DNA修复机制将其“粘贴”到特定位置。...
多项研究报道了在体内和体外使用靶向AAV/EV的益处;例如,Wood等人报道,这些载体可以通过血脑屏障并有效转导神经细胞。AAV的不同血清型,包括AAV1,AAV6和AAV9,已分别用于将转基因靶向递送到耳蜗和前庭毛细胞,神经元和少突胶质细胞中。它表明了这种基因传递到各种细胞类型的方法的兼容性。
Surprisingly, AAV6 evoked no detectable viral response. We also found Cas9/sgRNA ribonucleoprotein treatment to be well tolerated, in spite of eliciting a DNA damage signature. Overall, this data establishes a benchmark for cellular tolerance of CRISPR/Cas9-AAV6-based genome editing, ensuring that...