cas13a的RNA识别和内切功能也使其可以应用于转录调控、DNA检测等方面。但相关研究还比较初步。目前cas13a技术主要应用于RNA的检测与诊断。它提供了高灵敏度和内切特异的RNA识别手段，有潜力应用于病原体检测、生物标记、RNA编辑和基因治疗等方面。但相关技术还需要进一步提高成熟度和精确度，需要考虑诸如非特异性内切...
CRISPR-Cas13a系统包含两部分:Cas13a蛋白与sgRNA。Cas13a蛋白属于CRISPR系统中的III类,是一种RNA酶,可以在RNA分子上产生双链断裂。sgRNA是一个短链导RNA,含有与靶RNA互补的20个核苷酸序列,可以引导Cas13a蛋白准确识别靶RNA。工作机制上,Cas13a蛋白与特定的sgRNA形成复合体,该复合体与细胞内的RNA分子相互作用,一旦发现...
结构显示CRISPR Cas13a蛋白具有REC和NUC两个叶片,其中NUC叶片包含两个HEPN结构域、Helical-2结构域以及连接两个HEPN结构域的连接结构域,两个HEPN结构域组成了CRISPR Cas13a蛋白切割target RNA的活性区域。 图1.LbuCas13a-crRNA靶RNA复合物的整体结构 CRISPR Cas13a蛋白具有两个独立的催化位点,用于其两种相互依赖的RNase...
为了解决这一问题,研究人员结合了simultaneous amplification and testing(SAT)与CRISPR/Cas13a,构建了SATCAS这一等温核酸检测平台,该平台能在40分钟内快速检测接近单拷贝的RNA分子。 一、SATCAS平台的工作原理 SATCAS(Simultaneous Amplification and Testing platform based on Cas13a)是一个由两条引物、逆转录酶、T7 ...
这些发现揭示出VI型CRISPR-Cas系统的Cas13a抵抗RNA噬菌体的作用机制,这就为将它作为一种RNA操纵工具加以应用铺平道路,如将它的RNA切割和附带切割活性用于基础研究、诊断和治疗。 4.Bioinformatics:首次开出CRISPR-RT程序,用于设计具有改善的靶标特异性的CRISPR-C2c2 crRNA ...
CRISPR/Cas系统是古菌和细菌的抵抗病毒和质粒侵染的重要免疫防御系统。CRISPR-Cas系统划分为两大类,第一大类CRISPR-Cas系统由多亚基组成的效应复合物发挥功能;第二大类是由单个效应蛋白(如Cas9, Cpf1, C2c1、C2c2 等)来发挥功能。其中,Cas9, Cpf1, C2c1和C2c2(也被称作Cas13a)均具有RNA介导的DNA核酸内切酶活...
最近,天津医科大学总医院康春生团队在Advanced Science(IF:15.804)在线发表题为"The CRISPR‐Cas13a Gene‐Editing System Induces Collateral Cleavage of RNA in Glioma Cells"的研究论文,该研究首次报道了CRISPPR-Cas13a系统能够经由crRNA介导,在过表达胶质瘤特异性突变---表皮生长因子受体III型突变(Epidermal Growth...
CRISPR-Cas13系统属于Type VI家族，包括Cas13a、b、c、d等多个亚型。Cas13蛋白都是由多结构域组成的单一蛋白，具有识别crRNA、切割RNA、甚至是切割pre-crRNA的功能。Cas13蛋白具有2个标志性的HEPN结构域，2个R-XXXX-H保守基序是HEPN结构域的核酸酶活性位点。除了Cas13蛋白外，Type VI家族基因位点上还包含CRISPR ...
CRISPR-Cas13a系统具有特异性识别并结合单链RNA序列从而非特异性切割RNA的特点,可应用于检测肿瘤外周血游离核酸,对早期肿瘤患者进行筛查与诊断。张婧等综述了靶向RNA的CRISPR-Cas13a技术应用于肿瘤诊断与治疗的研究进展,探讨了CRISPR-Cas13a系统对癌症治疗...
这些发现揭示出VI型CRISPR-Cas系统的Cas13a抵抗RNA噬菌体的作用机制,这就为将它作为一种RNA操纵工具加以应用铺平道路,如将它的RNA切割和附带切割活性用于基础研究、诊断和治疗。 4.Bioinformatics:首次开出CRISPR-RT程序,用于设计具有改善的靶标特异性的CRISPR-C2c2 crRNA ...