1)筛选肿瘤发生发展的相关基因:CRISPR/Cas9文库可筛选维持肿瘤细胞生长发育的相关基因,从而针对这些靶基...
候选基因的进一步验证非常必要,使用CRISPR/Cas9技术进行单个基因敲除,通过筛选单克隆细胞构建候选基因敲除细胞系,在基因分型和免疫染色确认基因已被敲除后,检测候选基因敲除对病毒复制的影响,同时可通过遗传互补试验确定其作用是否由基因敲除所致。 需要多少个细胞? 如上所述,通常使用低于 30% 的 MOI 来尝试确保没有细胞...
《科学》杂志中关于CRISPR 激活、筛选有新进展,CRISPR 激活 (CRISPRa) 和 CRISPR 干扰 (CRISPRi) 筛选是测试基因功能得失的强大工具,但它们的使用在很大程度上仅限于永生化细胞系。Smite等人报告了一种优化方法,使他们能够对人类原代 T 细胞进行全基因组 CRISPRa 和 CRISPRi 筛选。然后,这种方法被用来检查调节关键...
CRISPR/Cas9筛选技术可以应用于药物靶点筛选中,通过大规模筛选技术,可以系统的分析、验证一些与抗药性相关的基因,从而为疾病治疗提供相关数据。 比如这篇发表在Science上的文章,研究人员利用CRISPR/Cas9文库对人类黑色素瘤A375细胞中的18,080个基因进行筛选,最终发现NF2、CUL3等4个基因参与了黑色素瘤A375细胞中的耐药调...
文库筛选原理利用的就是这种信息提取方式,然后将信息整合完成,再进行详细的筛选模式,判断数据的有效性。
CRISPR文库筛选应用于AML研究 寻找AML细胞生长必须基因 对于CRISPR文库筛选,最直接的用法就是筛选细胞生长...
相比之下,混合文库筛选成本低、操作简单且可用于体内研究,能够更全面地覆盖全基因组,侵染的细胞可在长期培养后检测结果。 CRISPR 文库多使用混合文库形式进行高通量筛选。需要多少个细胞?如上所述,通常使用低于 30% 的 MOI 来尝试确保没有细胞感染超过一种病毒粒子(因此不会感染超过一种 CRISPR 靶向...
刺激依赖性细胞因子调节剂的系统发现需要功能丧失和功能获得研究,这在人类原代细胞中一直具有挑战性。通过报告人类原代 T 细胞中的全基因组 CRISPR 激活 (CRISPRa) 和干扰 (CRISPRi) 筛选,以识别控制白介素-2 (IL-2) 和干扰素-γ (IFN-γ) 产生的基因网络。
多维度筛选工作的可行性。填补了市场上除人、鼠以外的其他物种的CRISPR文库的空缺,拓展了CRISPR的应用...