当将CRISPR - Cas9系统导入人体进行基因治疗时，人体免疫系统可能会对Cas9蛋白产生免疫反应。由于Cas9蛋白来自细菌，人体免疫系统可能将其识别为外来病原体，从而引发免疫排斥，影响基因编辑的效果，甚至可能对患者造成严重的不良反应。2. 应对免疫反应的措施 为了解决免疫反应问题，一方面可以对Cas9蛋白进行改造，降低其免疫...
但是这两名专家很快转而研究依赖一种被称为Cas9的蛋白质的CRISPR系统,因为这个CRISPR系统比其他CRISPR系统更简单。 遭遇噬菌体入侵时,CRISPR会作出反应,此时细菌把间隔区DNA和DNA回文序列转录成一串长的RNA分子。tracrRNA(一个额外的RNA片段)和Cas9一起作用产生crRNA(源自间隔区的RNAs)。Charpentier的团队于2011年将这...
使用CRISPR-Cas9 切割 DNA 后,双链断裂可以通过两种细胞自然修复机制之一进行修复(图 3)。 在不存在修复模板的情况下,非同源末端连接(NHEJ)过程会导致 gRNA 定义的断裂周围有不同插入或缺失(插入缺失)的异质细胞群。可利用该过程在特定序列周围生成有随机缺失的细胞系,从而获得功能性敲除。
CRISPR/Cas9的应用 1. 基因敲除（Knockout）：通过NHEJ修复机制，CRISPR/Cas9可以引入小的插入或缺失突变，从而破坏基因的功能，实现在细胞或生物体中敲除特定基因的目的。这对研究基因功能和疾病模型的建立非常有用。2. 基因编辑和基因修复：通过HDR修复机制，研究人员可以使用CRISPR/Cas9引入特定的DNA序列以修复突变基因...
CRISPR-Cas9基因编辑技术主要有两种应用方式: 1.基因敲除(Knockout):通过CRISPR-Cas9在目标基因上引入双链断裂(DSB),细胞通过非同源末端连接(NHEJ)修复机制修复断裂,过程中可能引入插入或缺失(indels)突变,导致目标基因功能丧失。 2.基因插入或替换(Knockin):利用同源重组(HDR)机制,在目标基因上引入特定的突变或外源序...
使用CRISPR-Cas9 切割 DNA 后,双链断裂可以通过两种细胞自然修复机制之一进行修复(图 3)。 在不存在修复模板的情况下,非同源末端连接(NHEJ)过程会导致 gRNA 定义的断裂周围有不同插入或缺失(插入缺失)的异质细胞群。可利用该过程在特定序列周围生成有随机缺失的细胞系,从而获得功能性敲除。
浙江大学刘祥瑞、平渊和周天华课题组合作在Science Advances杂志上发表文章,报道了外泌体递送CRISPR-Cas9 RNP用于肝脏靶向的疾病治疗研究成果。该研究开发了一种方法,可以将Cas9 RNP装载到肝星状细胞(HSCs; LX-2)的外泌体中,用于治疗不同的肝脏疾病。与使用原代细胞相比,使用免疫细胞系具有均匀性、可重复性和操作性...
报道称，这种基因组编辑技术为在几乎所有生物体中的大量应用操作打开了大门。自2012年这一编辑技术由沙尔庞捷和杜德纳开发以来，CRISPR/Cas9已用于寻找针对多种疾病(包括癌症和艾滋病等)的新疗法，以及培育植物新品种等。为什么说这是革命性成果？报道称，这项技术可随意改变生物基因组。CRISPR/Cas9将对未来的医学产生...
CRISPR/Cas9是继锌指核酸内切酶（ZFN）”、“类转录激活因子效应物核酸酶（TALEN）”之后出现的第三代“...