一般而言,当细胞基因组内存在两个LoxP位点时,Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序列发生重组。Cre重组酶介导两个LoxP位点间的重组是一个动态、可逆的过程,重组的结果取决于两个loxP位点的方向,主要有以下情况:01删除(Deletion)如果两个LoxP位点位于一条DNA链上,且方向相同,Cre重组酶能有效切除两个LoxP位点间的...
Cre/loxP重组酶系统是对转基因受体细胞DNA上的特定序列进行定点切割和重新连接,从而在基因或染色体水平上对生物基因进行遗传改造的一种技术。其原理是重组酶Cre能识别loxP位点(特定的DNA序列),并使loxP位点间的基因序列被重组或删除。受此启发,科学家在检测抗虫基因成功导入烟草细胞后,尝试用Cre/loxP重组酶系统删除转基...
Cre-lox重组是一种用于细胞DNA的特定位点上的特异性重组酶技术,其特点在于可以对指定的特定细胞群进行DNA修改。该技术使用Cre重组酶对loxP序列(由反向重复序列
LoxP 位点是有方向的,形成四聚体的两个 loxP 位点是平行的,随后这两个 loxP 位点间的双链 DNA 被 Cre 重组酶切掉,然后切口在 DNA 连接酶的作用下重新连接。重组的结果取决于两个 loxP 位点的方向,主要有以下几种可能: 1.如果两个 loxP 位点位于一条 DNA 链上,且方向相同,Cre 重组酶能有效敲除两个 loxP...
Cre/loxP重组酶系统调控基因的表达,在目的基因上游插入带有loxP位点的编码终止密码子的序列,Cre酶会对loxP位点进行切开,终止密码子不发挥作用,因此目的基因表达。 (3)小问详解: 启动子是决定RNA聚合酶转录起始位点的DNA序列,终止子是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列,启动子一般在目的基因的左侧(外侧),终止子在...
Cre 酶改变质粒的方式是将 DNA 链断裂,再重新组合连接,形成新的 DNA 分子,相当于基因重组。 ( 2 )将重组质粒导入细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法等,其中导入到植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法。抗除草剂基因可以作为标记基因,检测目的基因是否导入成功,是因为抗除草剂基因与目的基因在同一个质粒上,两者...
Cre酶识别两个相同的LoxP序列,进行切除,片段1自身环化且带有待敲除基因,因此保留片段2,从而实现目标基因的敲除,如果两个lxP位点位于同一条DNA上且方向相反,Cre酶会使loxP间的序列反转。 (3)小问详解: Cre/loxP重组酶系统调控基因的表达,在目的基因上游插入带有loxP位点的编码终止密码子的序列,Cre酶会对loxP位点进...
科学家尝试使用Cre/loxP位点特异性重组系统,在检测目的基因导入成功后,删除转基因烟草细胞内的抗除草剂基因。其技术过程如下(图中的■代表基因前的启动子),据图回答:(1)loxP是一种只有34个碱基对构成的小型DNA片段,是有两个13个碱基对反向重复序列和中间间隔的8个碱基对序列共同组成,自身不会表达,插入质粒后也不...
Cre-loxP位点特异性重组系统(简称Cre-loxP重组系统)的建立,为完善基因编辑小鼠模型的构建,进一步开展条件性靶基因功能的研究,提供了有效工具。回顾Cre-loxP重组系统在小鼠研究中的实际应用,研究者们认识到,对该技术应用中存在的某些风险与影响因素,给予充分了解与关注,将有助于提升靶基因编辑小鼠模型研究结果的准确性与...
回顾Cre-loxP重组系统在小鼠研究中的实际应用,研究者们认识到,对该技术应用中存在的某些风险与影响因素,给予充分了解与关注,将有助于提升靶基因编辑小鼠模型研究结果的准确性与可靠性。 文章亮点 一、Cre-loxP位点特异性重组系统应用基本原理 二、应用Cre-loxP位点特异性重组系统,实现小鼠条件性靶基因功能研究...