因此,可以尝试引入这些辅助因子来增强基因敲除效果。 7、利用新一代基因编辑技术:随着基因编辑技术的不断发展,出现了许多新一代基因编辑工具,如CRISPR-Cas9等。这些技术具有更高的效率和精度,可以考虑将其与Cre-loxP系统结合使用,以进一步提高基因敲除效率。 通过综合考虑载体设计、转染效率、Cre重组酶表达调控、细胞或...
Brainbow技术就是根据loxP序列的改造而实现的。3.四环素诱导型tetO-Cre:将四环素调控系统与Cre-loxP系统...
Cre-loxP的基本原理 Cre-loxP重组是一种特定位点的重组酶技术,可以在DNA的特定位点上执行删除、插入、易位以及倒位。该系统可以针对特定的细胞类型或者采用特定的外部刺激,对细胞中DNA进行改造,在真核和原核系统中都适用。 Cre(Cyclization Recombination Enzyme):是一种重组酶,最早来源于P1噬菌体,属于λInt 酶超基因...
01删除(Deletion)如果两个LoxP位点位于一条DNA链上,且方向相同,Cre重组酶能有效切除两个LoxP位点间的序列 02倒转(Inversion)如果两个LoxP位点位于一条DNA链上,但方向相反,Cre重组酶能导致两个LoxP位点间的序列倒转 03易位(Translocation)如果两个LoxP位点分别位于两条不同的DNA链或染色体上,Cre酶能介导两条...
Cre/loxP重组酶系统是对转基因受体细胞DNA上的特定序列进行定点切割和重新连接,从而在基因或染色体水平上对生物基因进行遗传改造的一种技术。其原理是重组酶Cre能识别loxP位点(特定的DNA序列),并使loxP位点间的基因序列被重组或删除。受此启发,科学家在检测抗虫基因成功导入烟草细胞后,尝试用Cre/loxP重组酶系统删除转基...
re-loxP 是一种位点特异的基因重组技术,被广泛应用于特异位点的基因敲除、基因插入、基因翻转和基因易位,在真核生物和原核生物中均有广泛应用。 Cre-loxP 的基本原理 Cre 蛋白是一种重组酶,是causes recombination的缩写,于1981 年从 P1 噬菌体中被发现,属于 λInt 酶超基因家族。Cre 重组酶基因编码区序列全长...
Cre-loxP系统能够实现特定基因的敲除,其技术过程如图1所示。科学家把几种荧光蛋白基因和cre酶能识别并切割的序列(loxP1和loxP2)串在一起,构建如图2所示的
以病毒包装为基础,密切关注行业最前沿的科研进展,十二年深耕细作,创建了具有自主知识产权的分子生物学、细胞生物学、慢病毒、腺相关病毒、报告基因、抗体表达六大技术平台。2020年成立了专业细胞系子品牌DDXCELL,提供报告基因检测、病毒包装、工程细胞株构建,基因编辑及药物筛选评价等技术服务及相关产品。2022年载体品牌“...
Cre-LoxP系统是一种基因编辑技术,其工作原理主要基于Cre重组酶和LoxP位点的相互作用。 Cre重组酶是一种由343个氨基酸组成的单体蛋白,由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码。它具有催化活性,并能特异性识别LoxP位点。LoxP位点是由两个13bp的反向重复序列和一个8bp的间隔区域组成的34bp序列,其中反向重复序列是Cre重组酶的...
Cre/LoxP是一种常用的位点特异性的重组系统,可以用于原核生物和真核生物的基因组编辑,主要由两大组分组成:Cre重组酶(Cre recombinase)和一段叫做LoxP 位点的DNA 序列。Cre 重组酶是噬菌体P1编码的38kDd的蛋白,可以识别loxP上的两段13bp长的重组结合元件(recombinase binding elements, RBE) 发挥基因编辑作用。