种类:Cre-loxP系统是条件性基因编辑的一种常见方法。Cre重组酶和loxP位点是这一系统的核心组件。Cre重组酶可以在loxP位点之间进行切割和重组,从而实现基因的精确敲除或插入。📚 条件性基因编辑的应用 胚胎发育研究:通过在特定时间点敲除特定基因,可以研究这些基因在胚胎发育中的作用。例如,敲除小鼠胚胎发育过程中必需的...
A. Cre-loxP:该系统最早发现于噬菌体P1中,是目前应用最广泛的条件性基因编辑工具 (Nagy, A. 2000)[6]。噬菌体P1是一种感染大肠杆菌的病毒,其基因组中包含了一种名为Cre(Causes Recombination)的重组酶和特定的DNA序列loxP(Locus of crossing over (x) in P1)。Cre酶是一个由343个氨基酸组成的38kDa蛋白。
Cre-LoxP系统是一种在基因编辑中非常强大的工具,它主要由两部分组成:Cre重组酶和LoxP位点。Cre重组酶是一种由噬菌体P1编码的38kDa的单体蛋白,而LoxP位点是该酶的特异性识别序列,由两个反向的13bp回文序列和一个8bp的间隔序列构成。这个系统可以在LoxP位点之间进行DNA切割和重连,从而实现精准的基因编辑。 基因敲除的...
Cre-Loxp AAV 利用AAV作为载体,将Cre重组酶递送至目标细胞内。Cre重组酶是一种DNA重组酶,能够催化DNA分子上的重组事件,特别是在LoxP序列的两个LoxP位点之间引发基因组的重组。通过将Cre重组酶与AAV结合,可以实现对目标细胞内基因的特异性编辑和调控,从而实现基因功能研究和疾病模型的建立。 01.更强的区域特异性 由...
Cre-loxP系统的优点 应用 一、条件性基因敲除小鼠的构建 二、基因敲除、插入 三、基因激活 四、基因...
🔬 在现代生物学研究中,Cre/Loxp系统是一种非常强大的工具,广泛应用于基因编辑和功能基因组学。这个系统通过特异位点重组酶(Site-specific recombinases, SSRs)识别特定的重组位点(Recombination target sites, RTs),从而实现精确的基因敲除、插入、翻转和易位等操作。🔍 简单来说,Cre/Loxp系统利用重组酶在基因组中...
Cre-LoxP 系统是一种重组酶系统,能在DNA 特定位点上删除DNA 序列,是一种广泛应用的基因编辑工具。Cre基因的表达产物是Cre酶,LoxP是一段DNA 序列。当 Cre酶遇到同一个 DNA分子上含有两段方向相同的LoxP序列时,能将两段LoxP 中间的序列删除,删除序列会被降解。转基因玉米甲、乙两种基因(Cre基因和A 基因)在两对...
Cre-Loxp系统是基因编辑中的一颗璀璨明珠。虽然核心序列和酶切位点可能会发生变化,但这并不影响其整体的工作原理。这个系统的精髓在于其灵活性和可预测性。当四个Loxp位点同向放置在两个DNA上时,它们之间的序列会发生互换,类似于同源重组。这种操作可以用于敲除或增加基因,从而实现对基因组的精确编辑。记得...
Cre-LoxP系统可以调控基因表达,Cre可激活或抑制基因表达,这取决于其结构。常见构造类型包括: (1)依赖于Cre的基因表达:在目标基因上游(通常称为“lox-stop-lox”或“LSL”盒)插入一个带有loxP位点的停止密码子,Cre缺失时基因不表达。在Cre存在的情况下,停止密码子被切除,基因可以表达(图2)。
常见构造类型包括:(1)依赖于Cre的基因表达:在感兴趣的基因上游,在任何一侧(通常称为“lox-stop-lox”或“LSL”盒)放置一个带有loxP位点的停止密码子,可以防止Cre缺失时的基因表达。在Cre存在的情况下,停止密码子被切除,基因表达继续进行。 (2)依赖于Cre的基因敲除:相反,将loxP位点放在基因的两侧(称为“floxing...