基因敲除的原理是利用Cre-loxP系统对目的基因进行特异性重组。在构建基因敲除载体时,研究人员将两个loxP位点分别插入到目的基因的两侧。当携带Cre重组酶的载体转染进入细胞或动物模型后,Cre重组酶就会在两个loxP位点之间切割DNA,导致目的基因被删除或重排,从而实现基因敲除。 Cre-loxP实验步骤主要包括: 1、构建含有loxP位...
两个loxP位点的位置和方向决定了Cre重组的方式,包括敲除,反转和易位。 图1:LoxP 位点序列 2. Cre-loxP 应用场景 携带loxP的小鼠被称为floxed小鼠,当它与Cre小鼠交配后,Cre-loxP系统开始工作, 可以对两个loxP位点以内的基因进行重组,进而实现基因敲除、表达等目的。 • 组织特异性敲除 (Conditional Knockout, cKO...
Cre-loxP系统是基因编辑领域的核心技术，它由Cre重组酶和loxP位点组成。Cre酶，源自噬菌体P1，是38kDa的单体蛋白，其特异识别loxP位点，由两个13bp反向序列和8bp间隔序列构成。这个系统通过在loxP位点间进行DNA操作，实现对特定基因的精确操控，如基因敲除。基因敲除的核心原理是利用Cre-loxP系统，构建带有l...
两个loxP位点位于同一条DNA链且方向相同,Cre酶介导loxP间序列切除。 两个loxP位点位于同一条DNA链且方向相反,Cre酶介导loxP间序列反转。 loxP位点位于不同DNA链,Cre酶介导两条DNA链发生交换或易位。 Cre工具鼠的选择 “Cre-zoo” 工具鼠库之广泛——Flp;EIIa...
应用：在基因敲除中用于条件性敲除基因如诱导细胞或组织中的基因表达或沉默 与CRISPR-Cs9技术联用：提高基因敲除的效率和特异性 与病毒载体联用：将Cre-loxP与CRISPR-Cs9技术结合实现条件性敲除特定细胞或组织中的基因 CRISPR-Cs9技术的原理及应用 原理：利用RN指导的Cs9蛋白对DN进行切割实现对基因 组的编辑 应用：在...
在生物医学研究和基因功能探索中，条件性基因敲除技术占据了举足轻重的地位。其中，Cre-LoxP 系统以其独特...
1.1Cre-loxP技术基本原 1.2Cre-loxP技术应用 1.2Cre-loxP技术应用—与组织特异性启动子结合应用，启动子 albumininsulinadiposeprotein2 1.2Cre-loxP技术应用—与诱导性表达启动子结合应用，对 启动子 Mx1CMV-tTA 诱导物 IFNtetracycl 1.3Cre-loxP技术仍有不 2.CRISPR-Cas9技术 传统的基因打靶技术主要依赖于...
Cre-loxP基因敲除技术为我们实现了探索目的基因在体内功能这一目标,是先利用基因组的靶位点定位安装两个1oxP,再利用组织特异性的Cre重组酶切除目的片段,使靶基因在特异组织中功能缺失的情况下分析靶基因功能的方法.膝骨关节炎是一种随年龄增长缓慢退变的疾病,是由多因素叠加后相互影响所致的严重世界性致残疾病.探索...
百度试题 题目Cre-loxp系统常用于 A.基因敲除B.转基因技术C.抑制性消减杂交D.原位杂交E.细胞标记技术相关知识点: 试题来源: 解析 A 反馈 收藏
Cre-LoxP技术构建肝脏特异性HIF-2α基因敲除小鼠模型