最终完成Cre-loxP系统条件性靶基因小鼠研制的操作，通常需要通过floxed小鼠与相应Cre小鼠间的两步遗传交配繁殖过程。第一步交配，X基因Cre杂合小鼠（X基因Cre/+）与Y基因 floxed杂合小鼠（Y基因lox/+，即CKO打靶Y基因)，或Y基因 floxed纯合小鼠（Y基因lox/lox）交配，获得X基因Cre/+; Y基因lox/+ 后代杂合小鼠。...
Cre/LoxP是做基因修饰鼠最常用的工具, 如图2所示,含有Cre(催化两个位点间的基因序列发声环化重组的一种酶)的鼠与含有LoxP(能被Cre特异识别的一段34个碱基的DNA序列)的鼠交配,产生既含有Cre又有LoxP的鼠,在Cre重组酶的催化下,两个LoxP位点的序列发生环化重组删除,从而达到目的基因编辑,通过与组织特异性Cre交配产生...
3. 需要在特定的靶细胞/组织中鉴定Cre作用活性,以确保其作用的靶向特异性 4. Cre-loxP重组系统与其他重组系统联合应用,增加细胞谱系示踪研究的特异性及有效性 5. 新型诱导性DD-cre小鼠模型的建立,成为未来Cre-loxP可诱导重组系统的补充 6. Cre小鼠构建策略建议性指导原则及需要考虑的因素概括 基因编辑小鼠模型是当...
最终完成Cre-loxP系统条件性靶基因编辑小鼠研制的操作,通常需要通过floxed小鼠与相应Cre小鼠间的两步遗传交配繁殖过程。第一步交配,X基因Cre杂合小鼠(X基因Cre/+)与Y基因 floxed杂合小鼠(Y基因 lox/+,即CKO打靶Y基因),或Y基因 floxed纯合小鼠(Y基因lox/lox)交配,获得X基因Cre/+; Y基因lox/+ 后代杂合小鼠。第...
Cre重组酶可以去除loxp位点间的终止元件,因此基因只在具有Cre活性的细胞中表达。与cKO条件性敲除小鼠两条等位基因都需要纯合不同,条件性表达小鼠通常只要有1条等位基因携带突变即可满足实验要求,因此基因型通常需是Cre/+;flox/+,在F1代即可获得目的小鼠。
五、Cre转基因小鼠模型中Cre插入位点鉴定的挑战与重要性 六、Cre-loxP位点重组系统应用中常见风险及影响因素 七、Cre-loxP位点特异性重组系统应用中的思考与建议 正文 一、Cre-loxP位点特异性重组系统应用基本原理 所谓Cre-loxP位点特异性...
二、应用Cre-loxP位点特异性重组系统,实现小鼠条件性靶基因功能研究 三、不同Cre小鼠模型构建策略及方法特点 四、为什么要构建诱导性调控CreERT小鼠模型及其基本特征 五、Cre转基因小鼠模型中Cre插入位点鉴定的挑战与重要性 六、Cre-loxP位点重组系统应用中常见风险及影响因素 ...
最终完成Cre-loxP系统条件性靶基因编辑小鼠研制的操作,通常需要通过floxed小鼠与相应Cre小鼠间的两步遗传交配繁殖过程。第一步交配,X基因Cre杂合小鼠(X基因Cre/+)与Y基因 floxed杂合小鼠(Y基因lox/+,即CKO打靶Y基因),或Y基因 floxed纯合小鼠(Y基因lox/lox)交配,获得X基因Cre/+; Y基因lox/+ 后代杂合小鼠。第二...
flox cre小鼠基因型鉴定流程floxed cre 鼠标代表一种基因工程的菌株,其特征是有loxP站点侧绕特定基因或基因。 将这种肌肉模型基因化的目的是明确确认软体基因和cre rbinase基因的存在。 这种验证是研究人员不可或缺的先决条件,因为它直接影响到鼠标的phenotypic和行为特征。 基因分解程序要求从老鼠身上提取DNA,然后扩大...
图1:loxP位点的序列 ►►► 2、Cre-loxP应用场景: 携带loxP的小鼠被称为Floxed小鼠,当它与Cre小鼠交配后,Cre-lox系统开始工作,可以对两个loxP位点以内的基因进行重组,进而实现基因敲除、表达等目的。 组织特异性敲除(Conditional Knockout, cKO)