Cre-loxP 主要用于基因敲除,但它也会根据 loxP 位点的取向和位置诱导两个 loxP 位点之间的 DNA 反转和易位[1]。 02 常用的 Cre-loxP 诱变系统 图2. Cre-loxP 诱变系统的原理[1]。 ▐ Cre-ER (Tam) 系统 Cre-ER(Tam)系统,也称为他莫昔芬 (Tamoxifen)诱导的 Cre 系统,是 Cre-LoxP 系统中最为常用...
借助构建的两个LoxP位点，把两端带有LoxP位点的外源基因重组到基因组上，此种重组是双向的，既可以把外源...
一般而言，当细胞基因组内存在两个LoxP位点时，Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序列发生重组。重组的结果取决于两个LoxP位点的方向，主要有以下几种可能： 1、如果两个LoxP位点位于一条DNA链上，但方向相反，Cre重组酶能导致两个LoxP位点间的序列翻转；2、如果两个LoxP位点位于一条DNA链上，并且方向相同，Cre重组...
Cre-loxP 主要用于基因敲除,但它也会根据 loxP 位点的取向和位置诱导两个 loxP 位点之间的 DNA 反转和易位[1]。 02 常用的 Cre-loxP 诱变系统 图2. Cre-loxP 诱变系统的原理[1]。 ▐ Cre-ER (Tam) 系统 Cre-ER(Tam)系统,也称为他莫昔芬 (Tamoxifen)诱导的 Cre 系统,是 Cre-LoxP 系统中最为...
2. Flox小鼠:携带目标基因两侧插入了loxP位点的转基因小鼠(Flox是“flanked by loxP”的缩写)。这些loxP位点为Cre酶的作用提供靶标。loxP位点本身不会影响目标基因的功能,目标基因可以正常表达。 图1:loxP位点及其突变体位点 02 Cre/loxP系统的工作原理
条件性基因敲除的实现，依赖于Flox小鼠，其特点是在需要敲除的目的基因两侧各带有同方向的两个loxP位点，即形成loxP-GENE-loxP的结构。当这种Flox小鼠与Cre小鼠进行交配后，子代小鼠在特定细胞或组织中，目的基因会受到Cre重组酶的作用而被敲除。图 条件性基因敲除小鼠原理示意图更精准的诱导型Cre-loxP系统他莫昔芬（...
图1 Cre-LoxP基本作用原理 一、Cre-LoxP系统基本作用方式 一般而言,当细胞基因组内存在两个LoxP位点时,Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序列发生重组。重组的结果取决于两个LoxP位点的方向,主要有以下几种可能: 1、如果两个LoxP位点位于一条DNA链上,但方向相反,Cre重组酶能导致两个LoxP位点间的序列翻转; ...
loxP 位点是一个 34 bp 的序列,由两个 13 bp 的反转和回文重复序列和 8 bp 的核心序列组成。Cre-loxP 主要用于基因敲除,但它也会根据 loxP 位点的取向和位置诱导两个 loxP 位点之间的 DNA 反转和易位[1]。 02 常用的 Cre-loxP 诱变系统 图2. Cre-loxP 诱变系统的原理[1]。
图1 Cre-LoxP基本作用原理 一、Cre-LoxP系统基本作用方式 一般而言,当细胞基因组内存在两个LoxP位点时,Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序列发生重组。重组的结果取决于两个LoxP位点的方向,主要有以下几种可能: 1、如果两个LoxP位点位于一条DNA链上,但方向相反,Cre重组酶能导致两个LoxP位点间的序列翻转; ...
基于Cre-loxP系统的种种优点,研究人员们将它应用到科学研究中实现体内某特定基因在特定条件下的敲除,原理如下图所示。首先需要两只转基因小鼠。第一只转基因小鼠的获得是在体外构建一个目的基因两端含有loxP位点的基因序列,将这段序列转入胚胎干细胞内。通过同源重组技术替代野生型的细胞的基因序列。通过胚胎干细胞技术处...