Cre-Lox系统的优势在于可以利用组织特异性启动子特异性控制Cre在特定组织的表达，以实现在特定组织细胞中对目的基因的敲除或改造，更好的规避全身敲除小鼠的胚胎致死现象。1. Cre鼠的类型及应用 为了更好的控制Cre重组酶的表达时间，通过使用具有雌激素受体的突变配体结合结构域的Cre融合蛋白（Cre-ERT），可以实现对Cre...
Cre蛋白是一种存在大肠杆菌噬菌体P1的重组酶,它可以特异性识别细胞内基因或DNA上的LoxP序列并根据LoxP序列的位置和LoxP序列之间的关系,介导不同的特异性重组反应。 条件性基因敲除的基本原理利用的重组方式是:当两个LoxP位点位于一条DNA链上且方向相同Cre重组酶能有效地敲除两个LoxP位点间的序列(图A)...
Flox小鼠基因功能正常,可与在特定细胞或组织或特定时期表达Cre重组酶的Cre工具鼠交配后获得各种时空特异性基因敲除小鼠。 Flox区的选择需要考虑如下原则: 1、插入loxP的位置不能影响基因的正常功能。所以,loxP一般插入在exon两端的intron中或基因外区域,并且需距exon和转录起始位点需有一定距离,以免影响mRNA的剪切或启动...
【实验原理】 如图1所示,该系统中的Cre可识别DNA分子中特定的loxP序列,当DNA分子上存在两个同向loxP序列时,Cre可将两个loxP序列之间的DNA序列剪除,切口连接形成的环化产物被降解,从而达到敲除特定基因的目的。 (1)Cre的作用类似于基因工程中的___,DNA切口环化连接的过程需要___。(编号选填) ①质粒...
【题目】 “脑彩虹”是一项最新的大脑成像技术,通过荧光蛋白“点亮”大脑内的神经元,帮助科学家了解大脑。 ( 1 ) Cre 酶是该技术的关键酶,能随机识别两个相同的 loxP 序列,催化如图 1 所示的反应。 通过 Cre-loxP 系统敲除基因的基本原理是:
Cre-Lox系统的优势在于可以利用组织特异性启动子特异性控制Cre在特定组织的表达,以实现在特定组织细胞中对目的基因的敲除或改造,更好的规避全身敲除小鼠的胚胎致死现象。 1. Cre鼠的类型及应用 为了更好的控制Cre重组酶的表达时间,通过使用具有雌激素受体的突变配体结合结构域的Cre融合蛋白(Cre-ERT),可以实现对Cre活...
Cre蛋白是一种存在大肠杆菌噬菌体P1的重组酶,它可以特异性识别细胞内基因或DNA上的LoxP序列并根据LoxP序列的位置和LoxP序列之间的关系,介导不同的特异性重组反应。 条件性基因敲除的基本原理利用的重组方式是:当两个LoxP位点位于一条DNA链上且方向相同Cre重组酶能有效地敲除两个LoxP位点间的序列(图A)...