IP-MS的原理是将细胞裂解液或组织提取液等蛋白混合体系与结合有目的蛋白特异性抗体或标签抗体的磁珠进行孵化,促进“结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体-protein-A/G小珠”复合物的形成。 混合体系中能与目的蛋白相互作用的蛋白质通过特异性结合而与其他蛋白组分分离开来,通过蛋白纯化,获得与目的蛋白质相互作用的靶蛋白。 最...
IP：即指免疫沉淀（immunoprecipitation），用相应的抗体来纯化富集目的蛋白，例如图中“IP: Flag”的意思是用Flag标签抗体磁珠去拉Flag，与Flag融合表达的蛋白为诱饵蛋白，此时与该融合蛋白相互作用的其他蛋白都会因此被沉淀下来。IB：即指免疫印迹（immunoblotting）或western blot（WB），用来检测目的蛋白的存在与否，例...
第一块胶图为利用anti-FLAG沉淀FLAG标签，发现两个条带都在130KD处有蛋白，说明两组实验都存在B-FLAG蛋白且其大小为130KD，第二块胶图为利用anti-GFP标签沉淀GFP标签，发现第一条带在25KD存在蛋白而第二条带在130KD存在蛋白，说明第一组实验存在GFP标签，且大小为25KD，第二组实验存在A-GFP蛋白且大小为130KD。
IP:即指免疫沉淀(immunoprecipitation),用相应的抗体来纯化富集目的蛋白,例如图中“IP: Flag”的意思是用Flag标签抗体磁珠去拉Flag,与Flag融合表达的蛋白为诱饵蛋白,此时与该融合蛋白相互作用的其他蛋白都会因此被沉淀下来。 IB:即指免疫印迹(immunoblotting)或western blot(WB),用来检测目的蛋白的存在与否,例如图中“I...
该图为验证蛋白EDR1与蛋白EDR4之间是否存在相互作用的结果图。由图中可以得到,蛋白EDR4带有GDP标签,蛋白EDR1带有FLAG标签,该实验为利用蛋白标签来沉淀和检测蛋白;该co-ip实验实验被分为两组,第一组存在GFP标签及EDR1-FLAG蛋白,第二组存在EDR4-GFP蛋白及EDR1-FLAG蛋白;图中共有三组胶图,分别是Inut组,IP组,...
IP:即指免疫沉淀,用相应的抗体来纯化富集目的蛋白,例如图中“IP: Flag”意为使用Flag标签抗体磁珠下拉Flag,与Flag融合表达的蛋白为诱饵蛋白,与该融合蛋白相互作用的其他蛋白将因此被沉淀下来。 IB:即指免疫印迹或western blot(WB),用来检测目的蛋白的存在与否,例如图中“IB: Myc”是指用Myc抗体做WB检测,看样本中...
由图中可以得到,蛋白A带有GFP标签,蛋白B带有FLAG标签,该实验为利用蛋白标签来沉淀和检测蛋白;该Co-IP实验实验被分为两组,第一组存在GFP蛋白和B-FLAG蛋白,第二组存在A-GFP蛋白和B-FLAG蛋白;图中共有三组胶图,分别是Input组,IP组,以及Co-IP组。基本情况得到之后,开始进行分析:观察图片的顺序为Co-IP实验操作...
IP:即指免疫沉淀(immunoprecipitation),用相应的抗体来纯化富集目的蛋白,例如图中“IP: Flag”的意思是用Flag标签抗体磁珠去拉Flag,与Flag融合表达的蛋白为诱饵蛋白,此时与该融合蛋白相互作用的其他蛋白都会因此被沉淀下来。 IB:即指免疫印迹(immunoblotting)或western blot(WB),用来检测目的蛋白的存在与否,例如图中“...
GST,全称glutathione-S-transferase,即谷胱甘肽-S-转移酶蛋白,能够和谷胱甘肽(Glutathione,GSH)稳定结合,将GSH与琼脂糖珠/磁珠交联可得GSH琼脂糖珠/磁珠。 该实验中使用带有 GST 标签的诱饵蛋白,可以结合到 GSH 琼脂糖珠/磁珠上。当体系中存在能够与诱饵蛋白相互作用的目的蛋白时,目的蛋白会与 GSH 琼脂糖珠/磁珠上的...
GFP和FLAG是常见的蛋白标签。coip免疫共沉淀实验通常需要构建一个表达标签的目的基因质粒，该质粒转录翻译...