在蛋白生物学的世界里,Co-IP 是解锁蛋白质“朋友圈”的神兵利器。但如果操作不当,它可能会变成实验室里的“尴尬社交”。今天,我们就来聊聊如何让你的 Co-IP 实验优雅又高效,轻松把蛋白“拉下场”!1 什么是 Co-IP?免疫共沉淀 (Co-Inmunoprecipitation, Co-IP) 是一种利用目标蛋白特异性抗体与蛋白 A/G...
CO-IP(免疫共沉淀)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X结合的蛋白质Y也能沉淀下来。 从原理示意图可见,免疫共沉淀利用抗原 (红三角) 与蛋白 (蓝圆柱) 的特异性结合,再通过连接着树脂的抗体 (紫圆球) 去识别抗原,从细胞裂解液或者蛋...
免疫共沉淀(co-inmunoprecipitation, Co-IP or CoIP)是研究体内蛋白质-蛋白质相互作用以及建立蛋白间相互作用关系的有力工具,是经典的在生理条件下利用抗体从样品中捕获靶蛋白及其互作蛋白、复合体,能够特异性富集所研究的目的蛋白及其结合蛋白的一项技术,是确定蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 Co-IP实...
IP:全称immunoprecipitation,即免疫沉淀,这一步主要是为了纯化富集目的蛋白。Input:全细胞裂解液,含有细胞内所有的蛋白,可认为是阳性组。也就是处理完样本得到的细胞裂解液,在做IP实验之前,需要先跑WB,确认样本中含有蛋白A和蛋白B。Anti-A:A蛋白的免疫共沉淀抗体 IgG:Anti-A的同型对照抗体,即跟Anti-A同...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是一种利用抗原与抗体之间的专一性为基础,广泛应用于研究蛋白质与蛋白质相互作用的经典研究方法。 原理 其原理是如果细胞内两蛋白(A、B)有直接或间接的相互作用时,那么在温和的裂解条件下获得的蛋白样品中加入 A 蛋白的...
Co-IP实验标准操作全流程、实验结果图解读、实验常见问题分析&解决、实际应用场景等 ,一文帮助大家掌握免疫共沉淀技术。 如果有任何Co-IP实验问题,可以加福麦斯生物的Co-IP实验互助群,0广告,有技术老师还有很多热心的同学一起探讨! 一、Co-IP实验原理
🔬 免疫共沉淀(Co-IP)简介: 免疫共沉淀是一种利用抗体与抗原之间的特异性免疫反应来研究蛋白质间相互作用的方法。🔍 基本原理: 在细胞裂解液中加入抗原特异性抗体,通过免疫沉淀反应形成免疫复合物。经过纯化、洗脱后,可以通过SDS-PAGE电泳、Western blot或质谱鉴定出与抗原相互作用的蛋白质。🌈...
免疫共沉淀(Co-IP)是利用抗原与抗体之间的专一性作用为基础,用于研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的经典方法。利用免疫共沉淀可以检测两个已知蛋白之间的相互作用,或者利用已知蛋白寻找与之相互作用的未知蛋白。 相较于其他分子间相互作用...
因此,Co-IP的实验步骤可大致概括为以下4步:(1)裂解蛋白,得到蛋白的混合物;(2)将靶蛋白的抗体与蛋白混合物共同孵育;(3)洗脱,得到拉下来的蛋白;(4)再将拉下来的蛋白当作样本,用其互作蛋白的抗体进行检测。图1 Co-IP实验原理及流程(伯远生物科研绘图)。Co-IP结果如何看?虽然了解过Co-IP的原理...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是使用靶蛋白特异性抗体间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白来鉴定体内相关的蛋白-蛋白相互作用,是研究蛋白质互作的经典方法。有三种方法:...