在蛋白生物学的世界里，Co-IP 是解锁蛋白质“朋友圈”的神兵利器。但如果操作不当，它可能会变成实验室里的“尴尬社交”。今天，我们就来聊聊如何让你的 Co-IP 实验优雅又高效，轻松把蛋白“拉下场”！1 什么是 Co-IP？免疫共沉淀 (Co-Inmunoprecipitation, Co-IP) 是一种利用目标蛋白特异性抗体与蛋白 A/G...
CO-IP(免疫共沉淀)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X结合的蛋白质Y也能沉淀下来。 从原理示意图可见,免疫共沉淀利用抗原 (红三角) 与蛋白 (蓝圆柱) 的特异性结合,再通过连接着树脂的抗体 (紫圆球) 去识别抗原,从细胞裂解液或者蛋...
Co-IP全称Co-Immunoprecipitation，中文学名免疫共沉淀，是一种以抗体和抗原识别专一性为基础，用于研究蛋白质之间相互作用的经典方法。通俗点来说，假设我们需要研究样品中A蛋白和B蛋白之间是否存在一些相互作用，首先我们通过合适的方法处理样本，将蛋白提取出来（同时不能破坏蛋白之间的相互作用），然后用预先结合了琼脂...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是一种利用抗原与抗体之间的专一性为基础,广泛应用于研究蛋白质与蛋白质相互作用的经典研究方法。 原理 其原理是如果细胞内两蛋白(A、B)有直接或间接的相互作用时,那么在温和的裂解条件下获得的蛋白样品中加入 A 蛋白的...
Co-IP实验标准操作全流程、实验结果图解读、实验常见问题分析&解决、实际应用场景等 ,一文帮助大家掌握免疫共沉淀技术。 如果有任何Co-IP实验问题,可以加福麦斯生物的Co-IP实验互助群,0广告,有技术老师还有很多热心的同学一起探讨! 一、Co-IP实验原理
Co-IP实验结论: 通过特异性识别Protein X的抗体进行对于细胞或组织裂解液进行Co-IP,最终通过Western或质谱分析鉴定出Protein Y,并且未添加Protein X抗体的阴性对照组没有检测到Protein Y。此时最常见的错误是,推导获得Protein X和Protein Y存在相互的作用的结论。实际上,此时只能获得Protein X和Protein Y在同一个复合...
免疫共沉淀(Co-IP)是利用抗原与抗体之间的专一性作用为基础,用于研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的经典方法。利用免疫共沉淀可以检测两个已知蛋白之间的相互作用,或者利用已知蛋白寻找与之相互作用的未知蛋白。 相较于其他分子间相互作用...
因此，Co-IP的实验步骤可大致概括为以下4步：（1）裂解蛋白，得到蛋白的混合物；（2）将靶蛋白的抗体与蛋白混合物共同孵育；（3）洗脱，得到拉下来的蛋白；（4）再将拉下来的蛋白当作样本，用其互作蛋白的抗体进行检测。图1 Co-IP实验原理及流程（伯远生物科研绘图）。Co-IP结果如何看？虽然了解过Co-IP的原理...
IB:即指免疫印迹或western blot(WB),用来检测目的蛋白的存在与否,例如图中“IB: Myc”是指用Myc抗体做WB检测,看样本中是否存在Myc标记的蛋白;值得注意的是,抗体应使用兼容IP实验的。 Iuput:指阳性对照组,是IP前制备蛋白样本时预留下的部分样品,进行WB实验确认目的蛋白存在,以排除假阳性结果的干扰 ...
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是使用靶蛋白特异性抗体间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白来鉴定体内相关的蛋白-蛋白相互作用，是研究蛋白质互作的经典方法。有三种方法：...