随后观察IP组,该组图表示的是利用anti-FLAG对EDR1-FLAG蛋白进行沉淀,图上显示两组实验在130kd都存在蛋白,说明两组实验的EDR1-FLAG被沉淀下来。 最后观察Co-IP实验组,该组图表示在IP组的基础上进一步利用anti-GFP检测GFP标签,图上显示第一组实验没有条带,而第二组实验在130kd处有蛋白。说明IP组没有把GFP标签共...
在蛋白生物学的世界里,Co-IP 是解锁蛋白质“朋友圈”的神兵利器。但如果操作不当,它可能会变成实验室里的“尴尬社交”。今天,我们就来聊聊如何让你的 Co-IP 实验优雅又高效,轻松把蛋白“拉下场”!1 什么是 Co-IP?免疫共沉淀 (Co-Inmunoprecipitation, Co-IP) 是一种利用目标蛋白特异性抗体与蛋白 A/G...
Co-IP是研究蛋白质相互作用的经典方法,虽然存在一些局限性,但通过精心设计和操作,可以获得可靠的实验结果。0 0 发表评论 发表 作者最近动态 搞科研的Kvemia暄米 2024-11-19 苹果地图更新:台湾省名正式上线🍏🎉🌍 ...全文 搞科研的Kvemia暄米 2024-11-19 云渲染到底解决了什么问题?云渲染,听起...全文...
CO-IP(免疫共沉淀)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X结合的蛋白质Y也能沉淀下来。 从原理示意图可见,免疫共沉淀利用抗原 (红三角) 与蛋白 (蓝圆柱) 的特异性结合,再通过连接着树脂的抗体 (紫圆球) 去识别抗原,从细胞裂解液或者蛋...
Co-IP全称Co-Immunoprecipitation,中文学名免疫共沉淀,是一种以抗体和抗原识别专一性为基础,用于研究蛋白质之间相互作用的经典方法。通俗点来说,假设我们需要研究样品中A蛋白和B蛋白之间是否存在一些相互作用,首先我们通过合适的方法处理样本,将蛋白提取出来(同时不能破坏蛋白之间的相互作用),然后用预先结合了琼脂...
细胞免疫共沉淀实验(Co-IP)是一种研究细胞内蛋白质相互作用的重要方法。其基本原理是,如果细胞内两种蛋白质(A和B)有直接或间接的相互作用,那么在温和的裂解条件下获得的蛋白样品中加入A蛋白的抗体,可以将A蛋白沉淀下来,与其直接或间接相互作用的B蛋白或C蛋白也会一起被沉淀下来。通过Western blot检测沉淀中是否存在...
免疫共沉淀(Co-IP)是利用抗原与抗体之间的专一性作用为基础,用于研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的经典方法。利用免疫共沉淀可以检测两个已知蛋白之间的相互作用,或者利用已知蛋白寻找与之相互作用的未知蛋白。 相较于其他分子间相互作用...
因此,Co-IP的实验步骤可大致概括为以下4步:(1)裂解蛋白,得到蛋白的混合物;(2)将靶蛋白的抗体与蛋白混合物共同孵育;(3)洗脱,得到拉下来的蛋白;(4)再将拉下来的蛋白当作样本,用其互作蛋白的抗体进行检测。图1 Co-IP实验原理及流程(伯远生物科研绘图)。Co-IP结果如何看?虽然了解过Co-IP的原理...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是使用靶蛋白特异性抗体间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白来鉴定体内相关的蛋白-蛋白相互作用,是研究蛋白质互作的经典方法。有三种方法:...
利用内源性CO-IP实验为验证两个蛋白是否存在已知作用,如果最终的结果为阳性,则可以证明两个蛋白之间存在相互作用;但如果结果为阴性,无法证明两个蛋白之间不存在相互作用,也有可能是蛋白在细胞内表达量低等原因导致。因此在进行内源性CO-IP验证两个蛋白是否存在相互作用时,建议先做过表达CO-IP作为对照。Detaibio...