Proteintech开发的Co-IP裂解液是一款较温和的裂解液,可用于从细胞、组织中制备非变性蛋白裂解物。特别推荐用于免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)实验,亦可用于ELISA、WB、IP等实验。本产品主要成分为Tris (pH 7.4),NaCl,Triton X-100,不含其它酶抑制剂,所以制备的裂解物还可应用于某些特定的酶切实验(如λ...
IP全称是immunoprecipitation,即免疫沉淀,这一步主要是为了纯化目的蛋白。 IB全称是immunoblotting,即免疫印迹,也就是常规的Western Blotting,用于显示目的蛋白。 WCL全称是whole cell lysates,即整个细胞的裂解成分。 HC全称是heavy chain,即重链, LC全称是light chain,即轻链。 现在将图分为三部分,先看第一部分,即上...
我们以常用的ripa裂解液为例主要含有左右的离子缓冲液接近生理浓度下的nacl一定比例的去垢剂和甘油以及各类蛋白酶抑制剂等来说明其各主要成份的用途进而帮助我们如何针对不同的实验目的和不同的蛋白质特性来选择最佳的裂解液 Co-IP原理与方法 免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)原理...
免疫沉淀/免疫共沉淀 (Immunoprecipitation/Co-immunoprecipitation, IP/Co-IP) 是经典地研究蛋白质-蛋白质相互作用 (Protein-Protein Interaction, PPI) 和蛋白质翻译后修饰 (Post-translational Modification, PTM) 的实验技术。 选择适合的裂解液(lysis buffer),既能充分提取蛋白质,同时又能保持蛋白质的天然构象和活性...
IP 裂解/洗涤缓冲液，2 50mL，0.025MTris，0.15M NaCl，0.001M EDTA，1% NP-40，5%⽢油；pH 7.4 改良型杜⽒PBS （20×），25mL，使⽤时稀释⾄：0.008M Na 、0.14MNaCl、0.01M KCl；pH7 100×条件缓冲液，5mL，中性pH 缓冲液 洗脱缓冲液，50 mL，pH 2.8，含有伯胺 ⾮还原型泳道...
CO-IP是基于抗体与抗原特异性结合，以及“Protein A/G”结合抗体FC段的原理，用于研究蛋白质复合体间的相互作用。二、主要步骤 试剂准备，细胞处理，抗体结合，抗原抗体复合物沉淀，清洗，上样，煮沸，电泳分析。三、实验解疑 1. 抗原未沉淀：确认抗原量、抗体特异性、裂解液成分。2. 抗体条带掩盖目标...
淬灭缓冲液,50 mL,1MTris-HCl 洗涤缓冲液,60 mL,1MNaCl IP裂解/洗涤缓冲液,2 50mL,0.025MTris,0.15MNaCl,0.001MEDTA,1% NP-40,5%甘油;pH 7.4 改良型杜氏PBS(20×),25mL,使用时稀释至:0.008MNa、0.14MNaCl、0.01MKCl;pH7 100×条件缓冲液,5mL,中性pH缓冲液 洗脱缓冲液,50 mL,pH 2.8,含有伯胺 非还原...
● 多种剂型可选,包括浓缩液、片剂和胶囊 ● 包装规格齐全,灵活选择 可考虑预先对样本进行pre-clear,降低后续的非特异性结合和背景 由于细胞裂解物是包含蛋白质、脂质体、糖及核酸的复杂混合物,其中可能含有与IP抗体、蛋白A/G或磁珠支持物非特异性结合的成分,这会影响IP靶蛋白的检测。预纯化可在正式进行免疫沉淀...
通常情况下,10 的HeLa细胞可以产生约10mg 胞团块,按照~3μg/μL的配比使用 IP 裂解/洗涤缓冲液(即 100μL IP 裂解/洗涤缓冲液可以裂解 ~300μg 细胞团块 •为了获得最佳结果,可添加ThermoScientificHalt 蛋白酶(货号:78429 )和磷酸酶(货号:78420) •IP裂解/洗涤缓冲液可兼容Thermo Scientific Pierce BCA ...