CHO-K1悬浮细胞的驯化 1 5%FBS的培养基(14326)培养正常的CHO-K1。 2当细胞汇合度达到80%-90%时,PBS洗涤,胰酶消化,2%FBS的培养基(14326)终止。计数并离心。 3 2%FBS的培养基(14326)重悬细胞,以1×105个细胞/毫升的密度接种细胞。 4当细胞的汇合度达到80%-90%,保留培养基中悬浮的细胞,观察悬浮细胞的活力...
本发明提供了一种将CHO‑K1细胞驯化为高表达细胞的方法,包括以下步骤:将贴壁的CHO‑K1细胞在完全培养基中培养,得到对数生长的CHO‑K1细胞;将对数生长的CHO‑K1细胞换至无血清培养基中悬浮培养;进行第一次换液驯化,得到驯化后的CHO‑K1细胞;将驯化后的CHO‑K1细胞换至化学限定培养基中悬浮培养;进行第二...
CHO-K1细胞在驯化之前细胞贴壁生长,呈梭形。经过Ex-CELL CD CHO 无血清培养基驯化后获得的无血清悬浮型CHO-K1-S 细胞呈球形,分散性好,细胞透亮,存活率高,生长状态好,如图2所示,说明成功完成了贴壁细胞的悬浮驯化。 图2 CHO-K1-S 悬浮细胞的生长状态(×100) 每天观察CHO-SFM、Ex-CELL CD CHO 和CDCHO 三种...
以CHO-K1细胞为研究对象,首先对贴壁细胞进行了悬浮驯化,之后比较了自配无血清培养基CHO-SFM,Sigma Ex-CELL CD CHO培养基和Gibco CD CHO培养基驯化悬浮细胞CHO-K1-S的培养效果.在相同实验条件下,统计细胞的增长率和存活率.结果表明,自配无血清培养基CHO-SFM优于Sigma CD-CHO和Gibco CD-CHO两种商业化培养基.关...
细胞无血清驯化过程中,从1%到0血清时,细胞会大量成团.然后应该怎样呢?吹散后还是成团.CHO-K1细胞。分泌抗体用的,不希望有外源的蛋白。我说的细胞团是由死细胞和活细胞
摘要:本发明属于生物工程技术领域,具体涉及无血清悬浮驯化CHO‑K1单克隆细胞株的建立及培养方法。 主权项:1.一种适合工程细胞株构建的单克隆宿主细胞的筛选方法,包括以下步骤:1低血清适应培养;2细胞无血清悬浮培养;3单克隆宿主细胞筛选与培养;4候选克隆荧光蛋白瞬时转染表达检测。 全文数据: 权利要求: 百度查询: 石...
本发明属于生物工程,具体涉及无血清悬浮驯化cho-k1单克隆细胞株的建立及培养方法。 背景技术: 1、cho细胞是由puck于1957年建成的中国仓鼠卵巢成纤维细胞系,发展至今,cho细胞已成为生物技术药物研发重要的工程抗体和重组蛋白的表达系统。其优点在于该细胞遗传背景清晰,具有很高的安全性;cho细胞是哺乳动物细胞,其翻译后修...
1、本发明的第一目的在于提供一种将cho-k1细胞驯化为高表达细胞的方法,该方法针对现有技术的不足,能够将cho-k1原始母细胞驯化为悬浮细胞,并且在驯化好的细胞群中筛选出表达能力更高的细胞,从而提高表达水平。 2、为实现本发明的上述目的,特采用以下技术方案: ...
CHO-K1悬浮细胞的驯化 1 5%FBS的培养基(14326)培养正常的CHO-K1。 2 当细胞汇合度达到80%-90%时,PBS洗涤,胰酶消化,2%FBS的培养基(14326)终止。计数并离心。 3 2%FBS的培养基(14326)重悬细胞,以1×105个细胞/毫升的密度接种细胞。 4 当细胞的汇合度达到80%-90%,保留培养基中悬浮的细胞,观察悬浮细胞的...
CHO-K1悬浮细胞的驯化 1 5%FBS的培养基(14326)培养正常的CHO-K1。 2当细胞汇合度达到80%-90%时,PBS洗涤,胰酶消化,2%FBS的培养基(14326)终止。计数并离心。 3 2%FBS的培养基(14326)重悬细胞,以1×105个细胞/毫升的密度接种细胞。 4当细胞的汇合度达到80%-90%,保留培养基中悬浮的细胞,观察悬浮细胞的活力...