CHO-K1悬浮细胞的驯化 1 5%FBS的培养基(14326)培养正常的CHO-K1。 2当细胞汇合度达到80%-90%时,PBS洗涤,胰酶消化,2%FBS的培养基(14326)终止。计数并离心。 3 2%FBS的培养基(14326)重悬细胞,以1×105个细胞/毫升的密度接种细胞。 4当细胞的汇合度达到80%-90%,保留培养基中悬浮的细胞,观察悬浮细胞的活力...
本研究中,在相同实验条件下,Ex-CELL CDCHO 无血清培养基培养的细胞密度略多于CD-CHO的无血清培养基可能是因为悬浮驯化培养时选用了Ex-CELL CD-CHO,实验过程中细胞在该培养基中不用经历换用培养基的适应过程,更适合CHO-K1-S细胞的悬浮培养。但是自配无血清培养基CHO-SFM中的细胞密度始终高于Ex-CELL CD-CHO 无...
本发明提供了一种将CHO‑K1细胞驯化为高表达细胞的方法,包括以下步骤:将贴壁的CHO‑K1细胞在完全培养基中培养,得到对数生长的CHO‑K1细胞;将对数生长的CHO‑K1细胞换至无血清培养基中悬浮培养;进行第一次换液驯化,得到驯化后的CHO‑K1细胞;将驯化后的CHO‑K1细胞换至化学限定培养基中悬浮培养;进行第二...
10、(2)将cho-k1细胞株置于血清浓度0.5～2%的培养基中悬浮培养,培养基中的其他组分为cd cho medium培养基和cho maxh medium培养基; 11、(3)将cho-k1细胞株置于完全去除血清的cd cho medium培养基中培养驯化,培养基中加入ht supplement和glutamax,待细胞生长状态良好,细胞倍增时间稳定,无细胞结团现象时细胞驯化...
1、针对现有技术存在的不足,本发明旨在解决所述问题之一。不需要特定的条件培养基,依靠常规市售培养基,提供一种驯化成功率高、效果好的cho-k1驯化方法,获得大小均一、单个分散、形态透亮、活率高的悬浮细胞株。 2、本发明所使用的无血清培养基名称为:chotec medium。其为现有培养基,购自江苏创健医疗科技股份有限...
1、本发明的第一目的在于提供一种将cho-k1细胞驯化为高表达细胞的方法,该方法针对现有技术的不足,能够将cho-k1原始母细胞驯化为悬浮细胞,并且在驯化好的细胞群中筛选出表达能力更高的细胞,从而提高表达水平。 2、为实现本发明的上述目的,特采用以下技术方案: ...
1.一种CHO-K1悬浮驯化无血清培养基,其特征在于,所述培养基至少包括以下重量份的组分: 2.一种CHO-K1悬浮驯化培养基,其特征在于,所述CHO-K1悬浮驯化培养基为将权利要求1所述无血清培养基添加不超过无血清培养基总重量10%的血清获得。 3.一种CHO-K1细胞驯化方法,所述方法至少包括以下步骤: (1)对CHO-K1细胞贴...
专利名称 CHO-K1悬浮驯化培养基及驯化方法 申请号 2018110546250 申请日期 2018-09-11 公布/公告号 CN109321519B 公布/公告日期 2021-01-08 发明人 肖志华,梁欠欠 专利申请人 上海奥浦迈生物科技股份有限公司 专利代理人 张新鑫;许亦琳 专利代理机构 上海光华专利事务所(普通合伙) 专利类型 发明专利 主分类号 C...
CHO-K1悬浮驯化培养基及驯化方法 (57)摘要 本发明提供一种CHO‑K1悬浮驯化培养基及驯化方法,所述培养基至少包括:CD CHO Medium、IGF‑1、泊洛沙姆188、条件培养基(Condition Medium)。采用上述培养基驯化CHO‑K1细胞使得细胞培养时间短(小于2个月),扩增速度快,细胞不结团且活率高。 法律状态 法律状态公告日...
以CHO-K1细胞为研究对象,首先对贴壁细胞进行了悬浮驯化,之后比较了自配无血清培养基CHO-SFM,Sigma Ex-CELL CD CHO培养基和Gibco CD CHO培养基驯化悬浮细胞CHO-K1-S的培养效果.在相同实验条件下,统计细胞的增长率和存活率.结果表明,自配无血清培养基CHO-SFM优于Sigma CD-CHO和Gibco CD-CHO两种商业化培养基.关...