CHO-K1(悬浮)细胞是一种常用的哺乳动物细胞系,它起源于中国仓鼠卵巢。这些细胞可以通过特定的驯化步骤从贴壁生长转变为悬浮生长,这对于生物制药工业中的大规模细胞培养非常重要。以下是关于CHO-K1悬浮细胞的培养和驯化的信息:细胞培养条件 培养基:CHO-K1悬浮细胞通常在含有F12K培养基的培养基中培养,该培养基可以...
CHO-K1悬浮细胞的驯化 1 5%FBS的培养基(14326)培养正常的CHO-K1。 2 当细胞汇合度达到80%-90%时,PBS洗涤,胰酶消化,2%FBS的培养基(14326)终止。计数并离心。 3 2%FBS的培养基(14326)重悬细胞,以1×105个细胞/毫升的密度接种细胞。 4 当细胞的汇合度达到80%-90%,保留培养基中悬浮的细胞,观察悬浮细胞的...
在悬浮培养过程中,易出现细胞死亡和结团现象[12],本实验采用长期适应驯化,通过传代丢弃死亡和结团细胞的数量,逐步筛选出适合悬浮生长的细胞CHO-K1-S。 本研究中,在相同实验条件下,Ex-CELL CDCHO 无血清培养基培养的细胞密度略多于CD-CHO的无血清培养基可能是因为悬浮驯化培养时选用了Ex-CELL CD-CHO,实验过程中...
CHO-K1是中国仓鼠卵巢细胞的一个亚克隆,最初由T. Puck在1957年建立。这些细胞通常以贴壁方式生长,但也可以通过驯化转变为悬浮生长。CHO-K1细胞因其高生长速率、易于培养和染色体异常频率低而被广泛用于生产重组蛋白,如单克隆抗体、干扰素和酶等。CHO-K1悬浮细胞的培养和驯化 CHO-K1细胞的悬浮培养通常涉及一系列驯...
cho-k1悬浮细胞培养 CHO-K1悬浮细胞是一种常用于生物技术研究和药物生产的中国仓鼠卵巢细胞系。这些细胞可以通过特定的培养条件和驯化步骤从贴壁生长转变为悬浮生长状态,这对于大规模的生物反应器培养非常重要。CHO-K1细胞在无血清或低血清培养基中能够达到较高的细胞密度,适用于重组蛋白和抗体药物的生产。在实验室中...
细胞株驯化: 复苏CHO-K1细胞转入T25cm2细胞培养瓶,以F12K基础培养基添加10%血清培养,待细胞长满单层后,加入0.25%胰蛋白酶消化,传代至装有完全培养基的T25cm2细胞培养瓶(Corning)中继续培养,当细胞铺满瓶底时,即得贴壁CHO-K1细胞。取贴壁CHO-K1细胞,换液,加入15mL含血清的完全基和15mL无血清CHO...
CHO-K1CHO-K1是未经改造的野生型CHO细胞。1968年存放在ATCC中,即现在的CHO-K1(ATCC CCL-61)。1985年分离出一个亚克隆保存在ECACC(85051005)。最初的CHO-K1细胞培养过程中需要添加血清,并且是贴壁生长的。2002年Lonza公司将CHO-K1细胞驯化至无血清培养基中悬浮培养,建立了CHOK1 SV细胞,主要和GS筛选系统组合...
本发明属于生物,具体涉及一种cho-k1的驯化方法。 背景技术: 1、中国仓鼠卵巢(cho)细胞是生物制品生产中广泛使用的细胞系。因其具有良好的基因组背景特征,并且在悬浮培养中具有相对较快的生长速度和较高的蛋白质表达产量,cho细胞是生产蛋白类生物制品最重要的表达系统。与其他表达系统相比,cho细胞对蛋白有精准的加工、...
1.一种cho-k1快速悬浮驯化培养基,包括cdchomedium,其特征在于,还包括如下组分中的一种或几种:chomaxhmedium、htsupplement、glutamax。 2.根据权利要求1所述cho-k1快速悬浮驯化培养基,其特征在于,所述培养基还包括0~10%血清。 3.一种cho-k1细胞快速驯化方法,其特征在于,按照如下步骤进行: ...
(1)对CHO-K1细胞贴壁降血清三级培养,降血清三级培养是指对CHO-K1细胞分3次培养,且每次培养时逐次降低培养基中的血清添加量至血清的添加量为无血清培养基总重量的1~3%; (2)悬浮驯化:将CHO-K1细胞置于如权利要求2所述的培养基中悬浮培养;所述培养基中血清添加量为无血清培养基重量的1~3%; (3)悬浮除血清培养...