本发明公开了一种稳定表达猪瘟病毒完整结构蛋白CHO‑K1细胞系的筛选方法,主要是利用PCR方法扩增猪瘟病毒(石门株)的完整结构蛋白(ShmEs)基因,并将其插入真核表达载体pcDNA3.4中,构建重组表达质粒pcDNA3.4‑ShmEs。利用瞬时转染的方法将该重组质粒转入CHO‑K1细胞,并使用抗生素G418进行筛选。试验结果表
CHO-K1FactorXa为了构建一种能快速表达人EPO蛋白的真核表达系统,本研究运用的方法是构建基于TNF-α跨膜段(transmembrane,TM)的pcDNA3.1-TM-FactorXa-EPO真核表达载体.把构建好的载体瞬时转染CHO-K1细胞,用FactorXa消化TM-FactorXa-EPO融合蛋白,rhEPO从FactorXa位点处切割下来,达到高效表达和可控酶切.结果本研究构建...
本发明属于生物技术构建领域,具体涉及一种重组人pcsk9蛋白在cho-k1细胞中的表达纯化方法。 背景技术: 人类的pcsk9基因在染色体1p32.3定位,全长为29kb,含有12个外显子,cdna全长有3617个碱基,它的编码含有692个氨基酸残基的蛋白质,并且其编码的蛋白质被称为神经细胞凋亡调节转化酶1(narc-1),它是一个独特的前蛋白...
本发明公开了一种稳定表达猪瘟病毒完整结构蛋白CHOK1细胞系的筛选方法,主要是利用PCR方法扩增猪瘟病毒(石门株)的完整结构蛋白(ShmEs)基因,并将其插入真核表达载体pcDNA3.4中,构建重组表达质粒pcDNA3.4ShmEs.利用瞬时转染的方法将该重组质粒转入CHOK1细胞,并使用抗生素G418进行筛选.试验结果表明,ShmEs基因在CHOK1细胞中...
CHO—K1FactorXa为了构建一种能快速表达人EPO蛋白的真核表达系统,本研究运用的方法是构建基于TNF-α跨膜段(transmembrane,TM)的pcDNA3.1-TM-FactorXa-EPO真核表达载体.把构建好的载体瞬时转染CHO-K1细胞,用FactorXa消化TM-FactorXa-EPO融合蛋白,rhEPO从FactorXa位点处切割下来,达到高效表达和可控酶切.结果本研究构建...
建立高表达PCV2-Cap蛋白的CHO-K1悬浮稳转细胞系,鉴定蛋白的免疫原性,为开发新型且有效防治猪圆环病毒的亚单位疫苗奠定基础.构建重组质粒pEE12.4-PCV2-Cap,转染CHO-K1细胞,通过加压筛选,有限稀释,细胞悬浮驯化及Western blot检测得到高表达Cap蛋白的悬浮稳转单克隆细胞株,并对该细胞株进行发酵,纯化得到的目的蛋白,通过...