CHO-K1细胞FADD是Fas/FasL系统的一个信号连接蛋白,通过传递凋亡信号,介导细胞凋亡。为了揭示FADD在牛卵泡发育过程中的调控作用,采用RT-PCR从牛卵巢组织中扩增FADD基因,将其cDNA终止密码子删除,采用定向克隆技术连接到带有水母绿色荧光蛋白(AcGFP)报告基因的真核表达载体pAcGFP-Nl中,构建融合蛋白重组质粒,经BglⅡ/EcoR...
绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)基因和人血清白蛋白(Human serum albumin,HSA)基因在该位点的定点整合和稳定表达.一,以整合了Zs Green1报告基因的CHO-K1-ZsGreen1-2C6细胞为研究材料,组合使用倒置荧光显微镜和流式细胞术,定量分析了ZsGreen1报告基因的表达情况.按照主细胞库到2000 L细胞生产罐...
表达载体经脂质体介导转染CHO-K1细胞,通过G418加压,筛选出稳定转染VP2基因的细胞株,经PCR检测证明VP2基因已经整合到细胞的染色体中;经RT-PCR,Westernblot分别检测VP2基因表达的mRNA和VP2蛋白,证明犬细小病毒VP2基因能够在CHO-K1细胞进行稳定性表达.这为下一步研究犬细小病毒VP2蛋白与宿主细胞的相互作用及VP2DNA...
价格:¥0 货号:CHO-K1/MT2/Gα15 产地:北京 点击询问我要采购 竭诚为您服务! BioVector NTCC典型培养物保藏中心 联系人:Dr.Xu, Biovector NTCC Inc. 电话:400-800-2947 工作QQ:1843439339 (微信同号) 邮件:Biovector@163.com 手机:18901268599 地址:北京 已注册 ...
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s412中,取cho-k1细胞培养液,以2ml/min的流速流经平衡好的nisepharoseexcel树脂; s413中,用bufferⅰ继续平衡nisepharoseexcel树脂的流速为2ml/min。 优选的,上述重组人pcsk9蛋白在cho-k1细胞中的表达纯化方法,s421中,取120ml的superdex200prepgrade树脂,装配成尺寸排阻层析柱,柱高60cm,柱直径是16mm,用bufferⅲ平衡...
CHO-K1细胞中正确表达,且表达的蛋白能够分泌到细胞外;成功驯化表达目的蛋白的单克隆细胞株至悬浮生长;发酵结果显示,发酵过程中活细胞密度可达6×10~6个/ml,细胞活力达80%以上,且目的蛋白的表达产量较高.结论:成功构建了表达PCV2-Cap蛋白的CHO-K1稳转细胞系,为新型猪圆环病毒疫苗的发展奠定了基础.讨论:目前CHO...
CHO-K1FactorXa为了构建一种能快速表达人EPO蛋白的真核表达系统,本研究运用的方法是构建基于TNF-α跨膜段(transmembrane,TM)的pcDNA3.1-TM-FactorXa-EPO真核表达载体.把构建好的载体瞬时转染CHO-K1细胞,用FactorXa消化TM-FactorXa-EPO融合蛋白,rhEPO从FactorXa位点处切割下来,达到高效表达和可控酶切.结果本研究构建...
本发明公开了一种稳定表达猪瘟病毒完整结构蛋白CHOK1细胞系的筛选方法,主要是利用PCR方法扩增猪瘟病毒(石门株)的完整结构蛋白(ShmEs)基因,并将其插入真核表达载体pcDNA3.4中,构建重组表达质粒pcDNA3.4ShmEs.利用瞬时转染的方法将该重组质粒转入CHOK1细胞,并使用抗生素G418进行筛选.试验结果表明,ShmEs基因在CHOK1细胞中...
成功克隆牛FADD基因,通过PCR方法在FADD阅读框两端引入了BglⅡ和EcoRⅠ克隆位点,并于起始位点前加入Kozak序列,成功构建pAcGFP-bFADD融合蛋白真核表达载体,重组质粒转染CHO-K1 24 h后在荧光显微镜下观察到绿色荧光,转染效率可达65%,通过RT-PCR扩增出654 bp的转录产物,并用Western blotting检测到51.4 kD目的蛋白的表达...