通过ChIP-seq,我们能够识别特定蛋白质结合的DNA区域。ChIP-seq数据分析图通常包括多种图形,如峰值图(peak profiles)、热图(heatmaps)、基因组浏览器视图(genome browser views)等。这些图形可以帮助研究人员直观地了解蛋白质在基因组上的结合模式及其生物学意义。 在ChIP-seq数据分析中,峰值图是最常见的图形之一。它...
通过这个例子我们可以看到,如果想要筛选一个转录因子结合的启动子是什么,可以用ChIP-seq的方法,筛选出来之后验证某个具体的启动子是否是该转录因子的靶启动子,用到的方法是ChIP-qPCR(本文献中写的是ChIP-PCR)的方法哦! 5.3 ChIP-seq研究核小体定位图谱 核小体定位影响转录因子(TFs)的结合位点和基因表达。对植物、...
将小鼠饲养在病原体的环境中,12小时光照/黑暗循环,温度保持22-24°C,相对湿度40–70%,吸入二氧化碳进行安乐死,提取样本对体细胞重编程,进行RNA-seq、ATAC-seq和ChIP-seq等测序分析。 3、结论 作者通过对小鼠体细胞重编程过程中进行转录组和ChIP...
图1:ChIP-seq实验和分析工作流程。(A)样品制备和测序;(B)ChIP-seq标准分析流程。 (1)环境设置(Environmental setup) NGS分析的计算工具通过各种计算机语言编写,例如C++,R,Python,Java和Perl语言。每种语言都需要不同的设置方法。大多数在Linux系统上执行,也...
二、组蛋白修饰的CHIP-seq分析方法区分增强子和启动子 组蛋白修饰能预测染色质的类型(异染色质或常染色质)、区分基因组功能元件(启动子、增强子、基因主体)以及检测决定这些元件处于活性状态或是抑制状态。例如H3K4me2和H3K4me3修饰大多数富集在转录起始位点附近的启动子上激活基因表达,而H3K27me2和H3K27me3与基因抑...
组蛋白分析流程可以解析点状结合和更长的染色质结构域,这些结构域由许多靶蛋白或靶修饰实例结合。组蛋白ChIP-seq 流程的output适合作为将染色质区域分类为功能类别的染色质分割模型的input。 图1:具有生物学重复实验的组蛋白ChIP-seq分析流程 图2:没有生物学重复实验的组蛋白ChIP-seq分析流程 ...
我们先看看一个可以分析的ChIP-seq数据长什么样子 start(reads)[1]#查看第一个read的位置 end(reads)[length(reads)] #查看最后一个read的位置 coverage(reads) #查看测序的覆盖度 在测序完成之后read是散在分布在基因组上的,但是呢。如果是结合了蛋白质的基因片段,在建库是就会被富集。被富集的片段,在测序中...
基本的ChIP 实验包括五个步骤(图1),分别是交联、染色质片段化、免疫沉淀、DNA 回收和纯化以及分析 DNA。由于实验材料的不同,可能会造成在交联和染色质片段化方面存在一些不同,需要不断优化条件,才能得到高质量的 DNA 从而进行后续的 ChIP 分析。 图1. ChIP-seq 流程概述 1. 交联。 在某些情况下,需要利用甲醛...
首先要看一下ChIP-seq数据的质量,数据的信号最好比background要强很很多。一般要有control,这样call peaks更准确可信, control主要有Input DNA 和 IgG两种,前一种更常用。 检测质量的一些方式: 1). peaks中reads的数量,如果peaks的reads普遍较少,则质量一般。
此节内容为Chip-seq基本流程介绍,包括 实验流程 建库流程 分析流程 2. 数据结果及生物信息分析 2.1. ChIP Sequencing 文库质检结果 文库片段质检,ChIP文库的染色质片段在100-500bp之间,建库加入约140bp的接头后,片段应该分布在250-700bp之间为最好。 Fragment Analyzer (FA)毛细管电泳检测: ...