染色质免疫沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation Assay, ChIP)的基本原理是在活细胞状态下把细胞内的蛋白质和DNA交联,超声波或酶切将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后用所研究的目的蛋白质抗体免疫沉淀蛋白质-DNA复合体,从而特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,以便用于下游的PCR分析和Sequence测序。 ChIP...
ChIP(chromatin immunoprecipitation assay, 染色质免疫共沉淀)是研究体内DNA与蛋白结合的重要技术,主要包括ChIP-qPCR和ChIP-seq两种;其中ChIP-qPCR用来验证与目标蛋白结合的已知DNA片段,ChIP-seq用来筛选与目标蛋白结合的未知DNA片段。 先用甲醛交联细胞内“蛋白-DNA”复合物,并用超声波破碎DNA至适合的长度。细胞裂解后,...
ChIP染色质免疫共沉淀 ChIP(chromatin immunoprecipitation assay, 染色质免疫共沉淀)是研究体内DNA与蛋白结合的重要技术,主要包括ChIP-qPCR和ChIP-seq两种;其中ChIP-qPCR用来验证与目标蛋白结合的已知DNA片段,ChIP-seq用来筛选与目标蛋白结合的未知DNA片段。 先用甲醛交联细胞内“蛋白-DNA”复合物,并用超声波破碎DNA至适...
每个人都使用EpiTect ChIP Antibody Kit中的RNA Polymerase II抗体(RNA Pol II或对照IgG进行ChIP实验。使用EpiTect ChIP qPCR Assay对特异性富集的ChIP DNA进行GAPDH最近启动子分析。结果展示为输入结果百分比(表格)、平均值(图轴y)和标准偏差(误差棒)。多个研究者的ChIP-qPCR of Pol II结果保持一致,只有4.8%的变...
染色质免疫沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation Assay, ChIP)的基本原理是在活细胞状态下把细胞内的蛋白质和DNA交联,超声波或酶切将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后用所研究的目的蛋白质抗体免疫沉淀蛋白质-DNA复合体,从而特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,以便用于下游的PCR分析和Sequence测序。
CHIP-SEQ qpcr (2014-07-23 13:48:55) 转载▼ 标签: CHIP,用Q-PCR方法进行定量分析 i. Normalizeeach ChIP DNA fractions’ Ct value to the Input DNA fraction Ct value for the same qPCR Assay (ΔCt) to account forchromatin sample preparation differences. ΔCt [normalized ChIP] = (Ct [...
最近做了CHIP,用Q-PCR方法进行定量分析,现将我对一些文献资料的总结传上,希望对大家有帮助!i. Normalizeeach ChIP DNA fractions’ Ct value to the Input DNA fraction Ct valuefor the same qPCR Assay (ΔCt) to account forchromatin sample preparationdifferences.ΔCt [normalized ChIP] = (Ct [ChIP] ...
ChIP实验全攻略之技术流程 技术原理：l染色质免疫沉淀技术（Chromatin Immunoprecipitation Assay, ChIP）的基本原理是在活细胞状态下把细胞内的蛋白质和DNA交联，超声波或酶切将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后用所研究的目的蛋白质抗体免疫沉淀蛋白质-DNA复合体，从而特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段，...
染色质免疫沉淀技术（Chromatin immunoprecipitation assay, ChIP）是目前唯一研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法，主要包括ChIP-qPCR和ChIP-seq两种；其中ChIP-qPCR用来验证与目标蛋白结合的已知DNA片段，ChIP-seq用来筛选与目标蛋白结合的未知DNA片段。染色质免疫沉淀ChIP实验原理 先用甲醛交联细胞内“蛋白-DNA”复合物，并...
染色质免疫沉淀技术(ChIP,Chromatin Immunoprecipitation Assay)通过与染色质片段共沉淀和qPCR技术,在体内检测与特异蛋白质结合的DNA片段。ChIP技术最大的优点就是在活体细胞状态下研究了蛋白质和目的基因结合状况,减少了体外实验的误差。在活体细胞中,先对与调节蛋白结合的染色质进行分离,然后通过一定的方法(例如:超声波)...