chip的基本原理是在活细胞状态下,固定蛋白质-DNA(染色质)复合物,并将其切断为一定长度范围内的染色...
ChIP 实验的优势在于能够捕捉系统中特定蛋白质-DNA 相互作用,并使用定量聚合酶链反应(qPCR)对相互作用进行量化。染色质免疫沉淀实验需要多种蛋白质组学和分子生物学方法,包括交联、细胞裂解(蛋白质-DNA 提取)、核酸剪切、抗体免疫沉淀、DNA 样本回收和 PCR...
1581 0 07:06 App 医学科研| CHIP检测结果,实验原理,PCR技术实操 1.3万 12 31:08 App IP实验之CHIP-染色质免疫共沉淀,师姐说:原理、步骤、结果都一次性说清楚了! 3.9万 37 10:32 App co-IP(免疫共沉淀)流程简述(轻松向交流) 2.6万 31 21:48 App 染色质免疫共沉淀(ChIP) 2.7万 10 11:25 App ...
PCR的原理基于DNA的复制和酶的催化作用。 PCR通常由三个步骤组成:变性(Denaturation),退火(Annealing)和延伸(Extension)。在变性步骤中,DNA双链被加热至高温,使其解开成两条单链DNA。在退火步骤中,温度降至稍低,并引入PCR引物(引物是两侧与目标DNA序列互补的短DNA片段),引物会与目标DNA序列上的两个互补区域结合。
技术原理:l染色质免疫沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation Assay, ChIP)的基本原理是在活细胞状态下把细胞内的蛋白质和DNA交联,超声波或酶切将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后用所研究的目的蛋白质抗体免疫沉淀蛋白质-DNA复合体,从而特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,以便用于下游的PCR分析和...
实验原理 染色质免疫沉淀技术(ChIP)通过与染色质片段共沉淀和PCR技术,在体内检测与特异蛋白质结合的DNA片段。ChIP技术最大的优点就是在活体细胞状态下研究了蛋白质和目的基因结合状况,减少了体外实验的误差。在活体细胞中,先对与调节蛋白结合的染色质进行分离,然后通过一定的方法(例如:超声波)随机剪切染色质,用调节蛋...
一、原理 ChIP实验的基本原理是通过交联染色质上的蛋白质与DNA分子,然后用特异性抗体将蛋白质-DNA复合物沉淀下来,最后通过PCR或测序等方法检测目标DNA序列的富集情况。 ChIP实验的步骤包括:交联、裂解、免疫沉淀、洗涤和DNA分离等。具体步骤如下: 1.交联:将细胞或组织进行交联,使得染色质上的蛋白质与DNA形成稳定的交...
Chip qPCR的原理基于聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR),PCR是一种通过DNA聚合酶扩增目标DNA的技术。而Chip qPCR则是在PCR基础上,结合了微流控芯片和光学检测技术,实现了高通量定量PCR分析。 二、Chip qPCR的关键步骤 1.样本制备 首先,需要从待分析的样本中提取目标DNA,并根据实验需求进行纯化和稀释。样本...