三、CD8+T细胞和肿瘤细胞共培养 Day1: 接上一篇CD8+T激活,按1 : 1的比例,使用CD3/CD28激活剂(提供第一第二信号)刺激CD8+T细胞,并将其培养在含10% FBS、1%青链霉素双抗生素和10ng/ml IL-2(激活后T细胞才会表达IL-2受体)的DMEM/1640完全培养基中。调整细胞密度为1×106 cells/ml,每2
在d3 p.i.时的引流腘窝淋巴结中,观察到大的P14 T细胞(很可能是被激活的T细胞母细胞--淋巴母细胞)停止迁移并与cDC1s相互作用至少1小时(图1,D至G)。这表明,在初始激活后从DCs脱离的CD8 T细胞在这些滤泡下区域重新与抗原呈递的DCs进行长期相互作用。推测这些在滤泡下淋巴结区域的T细胞母细胞与cDC1s之间的二次紧...
在免疫反应中,初始CD8+T细胞能够特异性识别抗原提呈细胞(如DC细胞)表面的MHC I-抗原肽类复合物并被激活。进而分化为效应CD8+ T细胞。效应CD8+ T细胞具有较强的细胞毒性并分泌多种细胞因子。根据分泌细胞因子的不同、细胞毒性的强弱以及功能的不同,效应CD8+ T细胞可细分为不同的效应亚型,其中主要的三类效应亚型...
2025年1月16日,清华大学祁海教授、北京同仁医院张罗教授、清华大学王建斌副教授、清华大学刘欣副研究员在Nature发表共同通讯作者论文,GZMK-expressing CD8+ T cells promote recurrent airway inflammatory diseases,通过研究人类慢性鼻窦炎鼻息肉鉴定出一类记忆性CD8+ T细胞具有促进炎症的新功能,发现了补体被CD8+ T细胞...
通过引入酶活突变的Pcif1,进一步证实了Pcif1对CD8+ T细胞激活能力的调控作用依赖于其m6Am甲基转移酶活性。在机制研究中,研究人员通过m6Am测序技术、TMT和PRM测序等技术,筛选并鉴定出T细胞激活的关键基因Cd69以及铁死亡抑制基因Fth1和Slc3a2 mRNA为Pcif1调控CD8+ T细胞功能的重要下游靶基因。实验结果表明,Pcif1介导...
激活:使用CD3/CD28激活剂(提供第一和第二信号)来刺激CD8+T细胞。激活剂的比例、浓度以及激活时间等条件需要根据实验需求进行优化。扩增:将激活后的CD8+T细胞置于含有适当浓度的胎牛血清(FBS)、抗生素、细胞因子(如IL-2)等营养成分的完全培养基中进行培养。通过定期更换培养液、调整细胞密度等方式,可以促进CD8+...
文中报道了一种白癜风小鼠模型的建立方法,即在C57 BL/6背景小鼠中接种B16F10黑色素瘤细胞,接种的同时杀除Treg细胞,因黑色素瘤细胞和黑色素细胞存在共享抗原,这一操作激活了小鼠内源性的自体识别性CD8+杀伤性T细胞,从而杀伤表皮黑色素细胞,导致白癜风的发生。同时,文章介绍了如何使用流式细胞术及wholemount染色...
离心后,通过吸出单核细胞层并重悬,进行后续处理,最终使用完全培养基重悬细胞,用于实验或冻存。接下来,采用磁珠法提取并刺激CD8+T细胞。首先准备好提取buffer,按照比例计数PBMC,加入10e7个细胞进行buffer重悬。充分混匀CD8磁珠,加入细胞悬液中,冰上孵育15min。离心并弃去上清,重复步骤直至含激活磁珠...
长久以来,CD8+ T细胞被视为抗肿瘤、抗病毒的核心力量,其主要功能是在抗原刺激下释放细胞毒性颗粒并杀死靶细胞。补体作为人体古老的抗感染防御机制,通过抗体识别病原体并激活补体来杀死细菌。这两个免疫学概念在最近的研究中得到了新的突破。研究目的 该研究旨在深入探究CD8+ T细胞在慢性炎症疾病中的作用机制,并寻找...
首先发现,天冬酰胺(Asn)促进CD8+T细胞激活。可被CD3+CD28共激活的CD8+T细胞在Asn剥夺时明显减少,在回补Asn后回升。回补Asn会增加表达IFN-γ、TNF-α、GzmB的CD8+T细胞。Asn明显减少naïve CD8+T细胞数目,并且增加CD62LlowCD44highCD...