然后,将肿瘤细胞重新悬浮于培养基中,浓度为5×105 cells/ml,每孔1ml接种于24孔培养板内,在培养箱中孵育过夜。 Day 15: 收集CD8+T细胞 在第15天,我们收集CD8+T细胞并进行计数。对于所有的共培养孔,我们在上层置入小室(贴壁细胞可不必添加),按照1:1、2:1、5:1的比例分别将CD8+T细胞添加至小室上层,最终体积...
总的来说，这些数据表明在多种实体瘤中，肿瘤微环境中的T细胞相对于外周CD8+ T细胞具有更高水平的脂质。为了进一步证明是否由肿瘤微环境调控了CD8+ T细胞中脂质的累积，作者在体外模拟肿瘤微环境条件（营养匮乏，低氧），将肿瘤细胞和CD8+ T细胞进行共培养，结果观察到营养匮乏和低氧处理都能显著促进CD8+ T细胞中脂滴...
结果显示，与正常CD8+ T细胞（con）相比，IFN-α抑制了CD8+ T细胞中IFN-γ的产生，而沉默HSPA6或DNAJB1则逆转了这一现象（图9A）。为了研究IFN-α诱导是否影响肿瘤细胞中的铁死亡，作者将CD8+ T细胞与肿瘤细胞共培养。选择了九种不同的癌细胞系，并在体外用IFN-α刺激CD8+ T细胞。在连续用IFN-α刺激后，作者...
首先,作者将激活的T细胞进行单培养或与肿瘤细胞进行共培养,在不同的营养条件下构建多种模型,以识别伴随细胞毒性的CD8+T细胞的代谢变化。实验结果表明,肿瘤细胞的存在可以刺激抗原特异性CD8+ T细胞IFNg(干扰素g)和GzmB(颗粒酶B)的产生,并改变CD...
图1 TME模拟营养物质的利用率会损害CD8+T细胞的细胞毒性和PC活性。(A)在RPMI和CM中,CD8+T细胞活化,以及与肿瘤细胞共培养的示意图。T表示单独培养的T细胞,T co-c表示T细胞与肿瘤细胞共培养。(B)24h后检测RPMI和CM中B16-OVA肿瘤细胞的细...
图1 TME模拟营养物质的利用率会损害CD8+T细胞的细胞毒性和PC活性。(A)在RPMI和CM中,CD8+T细胞活化,以及与肿瘤细胞共培养的示意图。T表示单独培养的T细胞,T co-c表示T细胞与肿瘤细胞共培养。(B)24h后检测RPMI和CM中B16-OVA肿瘤细胞的细胞数量。(C)24h后检测RPMI和CM单培养CD8+T细胞的细胞数量。(D-F)CD8+T细...
将MHC-I阴性的CT2A-TRP2-β2mKO肿瘤细胞放置在Transwell板的底部,TRP2 T细胞和TRP2巨噬细胞的不同组合被添加到膜的同侧或对侧。将T细胞和/或巨噬细胞与肿瘤细胞物理分离消除了肿瘤杀伤活性,表明需要直接细胞间接触而不是可溶性因子(图4a)。 然后作者调查了巨噬细胞或T细胞是否更直接地参与了接触依赖性肿瘤细胞...
细胞系共培养后，患者6的基因编辑T细胞 γ（n = 3). g、 自体细胞系（M490）中neoTCR基因编辑的T细胞和预处理24小时的错配对照（M202）靶细胞的特异性靶细胞杀伤 γ（P:T比10:1；n = 4).图4. 从TIL和PBMC中分离新抗原特异性T细胞，以及对抗PD-1无反应的患者的新TCR抗肿瘤活性 a–c，...
因此,作者检查了是否添加骨髓源性巨噬细胞(BMDMs)可以让TRP2 T细胞在体外杀死CT2A-TRP2-β2mKO肿瘤。CT2A-TRP2或CT2A-TRP2-β2mKO(图3a)肿瘤细胞与TRP2 T细胞一起培养,同时加入TRP2肽负载的BMDMs(TRP2巨噬细胞)或未负载的BMDMs(未负载巨噬细胞)。虽然TRP2 T细胞单独(但不是TRP2巨噬细胞)能够有效杀死MHC...