CCK-8(Cell Counting Kit-8)细胞检测方法是一种常用的细胞增殖和细胞毒性评估方法。该方法基于细胞代谢活力与细胞数量的关联,通过测量细胞对CCK-8试剂的还原能力来评估细胞的活力水平。此方法操作简便、快速,广泛应用于生物医学研究和药物筛选等领域。 本文将详细介绍CCK-8的工作原理、分析流程,并对其优缺点
CCK-8法是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度、无放射性的比色检测法,可替代传统的MTT法。图 1. WST-8 反应原理图 图2. CCK-8 检测细胞活性原理图 2、产品用途 CCK-8法应用非常广泛，主要用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验、活细胞计数、细胞活力检测以及生物因子...
药物处理：依据实验设计预设药物浓度范围，确保浓度适中，既避免毒性效应不足，又防止过高浓度导致细胞死亡。CCK-8试剂的使用：加入CCK-8试剂后，应迅速进行孵育和吸光度测定，以防止反应时间过长带来的背景干扰。同时，要注意避光，因为WST-8反应对光线敏感。控制组设置：实验中必须设立空白对照组（不含细胞和药物），...
在加入CCK-8试剂后,需要在37°C、5% CO₂的条件下孵育1-4小时。具体的孵育时间可以根据细胞类型和实验条件来确定。一般来说,贴壁细胞的孵育时间为1-4小时,多数细胞在培养30分钟左右即可肉眼观察到明显的显色反应,培养3.5-4小时左右检测效果最佳。 显色时间 在加入CCK-8试剂后,可以通过肉眼观察孔内的显色程度...
1)细胞活力检测步骤 ①将悬浮细胞计数,梯度稀释7到~11个浓度后以100 μL/孔接种到96孔板中(384孔板为100 μL/孔)。 ②每孔加入10 μL(加入量为培养基的10%)的CCK8试剂(注意不要产生气泡,会影响OD值的读数),37℃ 5%CO2孵育1~4小时。 ③用酶标仪在450 nm波...
🔬 CCK-8法是一种广泛应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验、活细胞计数、细胞活力检测以及生物因子活性检测的实验方法。📊 实验步骤: 1️⃣ 制作标准曲线: 首先,使用细胞计数板准确计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后进行接种。
CCK-8法 CCK-8细胞活性检测试剂中含有WST-8 —— 一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以为线粒体内的脱氢酶验明正身。在脱氢酶作用下,WST-8被还原生成橙黄色的甲瓒产物,用酶联免疫检测仪在OD 450nm波长处测定其光吸收值。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同...
🔬 CCK-8法是一种常用的细胞活性检测方法,以下是详细步骤:1️⃣ 准备药物溶液:使用PBS配置浓度为5 mg·mL-1的药物溶液,依次稀释成200 μg/mL、100 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL、12.5 μg/mL五个梯度浓度。2️⃣ 细胞准备:收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100 μL,使待测细胞密...
CCK-8LDHCIK目的:探讨CCK-8法和LDH法检测CIK细胞活性的最佳条件。方法:经密度梯度法分离得到人外周血中单个核细胞,经细胞因子刺激培养14天收获CIK细胞,采用CCK-8法与LDH法检测CIK细胞对前列腺癌细胞毒活性。结果:CCK-8法的最佳检测时间为加入CCK-8试剂后3~4 h,适宜细胞数量范围为0.32×10~3~2.0×10~4个/孔...
Calcein-AM/PI 双染后经流式检测法能较好的区分活细胞和凋亡细胞,且其结果的准确性、稳定性和重复性强于 CCK-8法。 结论: 流式细胞术较 CCK-8法稳定性好,准确性高,是一种优于 CCK-8 法的检测免疫细胞毒活性的方法。【关键词】 乳腺癌; γδT 细胞;流式细胞术; CCK-8【中图分类号】 R730.43 【...