细胞毒性实验:每孔加入约5000~10000个细胞,100μl培养基(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。孔板周围加100μL PBS防止过度蒸发。2.检测方法在对应的检测时间点,从培养箱取出细胞,每孔加入10μL的CCK-8试剂,避光反映1-4h(具体孵育时间根据细胞数决定,一般OD值在0....
结果受细胞数量影响:CCK-8法的结果受到细胞数量的影响,因为细胞数量的变化会直接影响到吸光度的测量。如果细胞密度不均匀或存在细胞聚集现象,可能会导致结果的不准确性。 综上所述,CCK-8细胞检测方法是一种常用的细胞增殖和细胞毒性评估方法。该方法操作简便、快速,并具有高灵敏度、高可靠性和适用范围广的优点。同时...
CCK-8是一种高灵敏度、无放射性的比色检测法,用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数量,可替代传统的MTT法,常应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验等。尽管有人戏称CCK-8测细胞增殖实验只要有试剂盒就“有手就行”,但实际操作中仍有许多细节需要注意。本期细胞学堂将详细介绍CCK-8法的原理、...
6. CCK-8对细胞的毒性非常低,其他的实验,例如中性红法或结晶紫法,也可在CCK-8 法检测完后继续进行。7. 可以使用大于 600 nm 的波长,例如 650 nm,作为参考波长进行双波长测定,CCK-8 在参比波长处没有吸光值,设定参比波长的目的是为了去除由于样品浑浊所带来的吸收。8. 如果实验中待测物质有氧化还原剂...
CCK-8检测法,全称为细胞计数试剂盒8(Cell Counting Kit-8),是一种常用的细胞活性检测方法。下面将详细阐述其原理及实验步骤。 CCK-8检测法原理 CCK-8检测法的原理基于水溶性四氮唑盐WST-8的还原反应。WST-8(化学名为2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯基)-2H-四唑单钠盐)在...
酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰,可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。 CCK-8在0-5℃下能够保存至少6个月,在-20℃下避光可以保存1年。 加入CCK-8时,如果细胞培养时间较长,培养基颜色或pH值已变化,建议换用新鲜的培养基。 用酶标仪检测前需确保每个孔内没...
CCK-8(Cell Counting Kit-8)法是一种常用的细胞增殖和毒性检测方法,其实验步骤可以归纳为以下几点:一、实验准备 细胞准备:选择生长状态良好的细胞,进行常规胰酶消化后,离心收集细胞沉淀,并用含血清培养基重悬,制成单细胞悬液。细胞数量根据实验需求调整,对于细胞增殖实验,每孔可加入2×10³个细胞;对于细胞...
细胞毒性是指由细胞或化学物质引起的单纯细胞杀伤事件,不依赖于凋亡或坏死的细胞死亡机理。常用细胞毒性检测方法有 CCK-8 法、MTT 法、LDH 法。 1.与 MTT 法相比: (1)CCK-8 使用更为方便,无需洗涤细胞; (2)CCK-8 法能快速检测; (3)CCK-8 法的检测线性范...
使用酶标仪在450nm波长处测OD值,可间接性反应活细胞的数量。是一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。 因此,CCK-8实验可用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。 操作步骤 ...