2)CCK-8 使用之前,先做个标准曲线。用不同的细胞数接种,然后加入 CCK-8 1 小时,2 小时,3 小时检测 450nm 以 OD 值 1.0--2.0 为标准选择细胞数。 3)确认药物跟 CCK-8 不反应。在培养基中加入 CCK-8,2-3 小时后检测。以及在培养基中加入药物和 CCK-8,2-3 小时后检测。检测出来的 OD 值为空白对...
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确认药物是否具有氧化还原性,酌情更换不含药物新鲜培养基再进行CCK-8测定。 问:OD值太低怎么办? 答:提高细胞接种密度,或者增加CCK-8孵育时间,建议先做预实验确认最佳接种密度和孵育时间;确认细胞状态是否正常,若细胞状态不佳甚至死亡,建议重新接种状态良好的细胞进行实验;确认药物是否会抑制CCK-8反应,酌情更换不含药物...
1.第一次做实验时,建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入 CCK-8 试剂后的培养时间。 2.接种时注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来,导致每孔中的细胞数量不一致。 3.培养板周围一圈孔培养液容易挥发,为减少误差,建议培养板周围的四边每孔只加培养基。 4.若细胞培养时间较长,培养基颜色或 pH 发生...
总之,使用无血清培养基进行CCK-8实验可以提高实验的准确性和可靠性,但需要注意培养细胞类型和无菌操作等...
小M:培养基中的酚红不会影响实验结果,酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。 小白:CCK-8 和活细胞内的脱氢酶持续反应使溶液颜色不断加深,我该如何终止 CCK-8 反应呢? 小M:以下方法任选其一均可终止 CCK-8 反应:a). 在显色反应后,将培养板放置 4℃ 冰箱内;b). 每孔加 10 μ...
·若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。 ·如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。当然药物影响...
CCK-8是细胞实验室最常用的实验方法之一,主要用于细胞增殖实验、药物或试剂的细胞毒性实验、细胞的活性检测等一系列与活细胞数量与活性状态相关的检测实验。其基本特点是检测活细胞,基于细胞内脱氢酶的活性,可溶于水的产物(Formazan)在特定波长下具有吸收峰,检测的本质是用比色法得到的数据推论活细胞数量及脱氢酶活性。
血清不影响。但是建议最好以换液的方式, 按照 1:10 比例用CCK8溶液:基础培养基配好,比如100ul培养...
CCK8实验 具体操作步骤: 1.将昨日铺的96孔板拿出,在操作台上用直吸管将铺有细胞的60个孔里面的上清液全部吸掉,再加PBS200ul洗一次,最后将96孔板里面所有的液体全部吸掉。 2.96孔板加药: 先加药---再加无血清培养基---最后再加PBS 1PBS 2PBS 3PBS 4PBS 5PBS 6PBS 7PBS 8PBS 9PBS 10PBS 11PBS 12PBS...