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1、空白组(绿色):培养基; 2、对照组(粉色):培养基+细胞+PBS; 3、实验组(红色):培养基+细胞+待测样品; 4、白色孔加入100ulPBS或培养基,以缓解蒸发。 空白孔(不含细胞和待测物质的培养基,含有CCK-8) 对照孔(含有细胞的培养基、CCK-8,不含有待测物质) 实验孔(含有细胞的培养基、CCK-8、待测物质) 计...
8. 如果实验中待测物质有氧化还原剂,在不含细胞的培养基中加入药物,然后加入 CCK-8 试剂在一定时间内检测,和不加药物的培养基进行比较 (只加 CCK-8 试剂),如果 OD 值明显偏高,则说明有反应。 9. 加 CCK-8 试剂时速度要快,减少试剂在移液器上的残留,加入 CCK-8 试剂后轻轻震培养板,为了避免加样时由于...
CCK-8细胞检测方法的分析流程一般包括预处理、处理组与对照组的设置、CCK-8试剂的加入、孵育和吸光度测定等步骤。 1预处理 将待测细胞接种于培养皿中,培养至适当的细胞数目。预处理包括适当的细胞培养条件、培养基的选择和培养时间的控制 2处理组与对照组的设置 ...
2. 进行CCK-8实验,弃掉孔内原有培养基并每孔加入新配制的含有终体积1/10 CCK-8溶液(CCK-8试剂盒)的完全培养基,37℃细胞培养箱内孵育1-4hr(根据细胞量决定时间长短,细胞越多OD值越大且随着孵育时间的延长OD值也会变大,最适OD值应保持在2以内)。
A(实验):具有细胞、CCK8溶液和药物溶液的孔的OD值 A(对照):具有细胞、CCK8溶液而没有药物溶液的孔的OD值 A(空白):具有培养基、CCK8溶液而没有细胞的孔的OD值 四、用途与优缺点 用途:1、细胞增殖测定;2、药物筛选;3细胞毒性测定;4肿瘤药敏实验;5、微生物对细胞的毒性或增殖的实验。优点:1、...
Cell Counting Kit-8,简称CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒。WST-8是一种类似于MTT的化合物,它在电子耦合试剂1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸二甲酯存在条件下,可以被线粒体内的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色Formazan(参考图1),生成的Formazan数量与活细...
1、当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1,000 个/孔(100 μL 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 (100 μL培养基)。 2、酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰,可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。
细胞毒性实验:每孔加入约5000~10000个细胞,100μl培养基(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。孔板周围加100μL PBS防止过度蒸发。2.检测方法在对应的检测时间点,从培养箱取出细胞,每孔加入10μL的CCK-8试剂,避光反映1-4h(具体孵育时间根据细胞数决定,一般OD值在0....