先取已知数量的细胞悬液加入到培养板中，然后用培养基依次等比例稀释成一个系列浓度的细胞悬液，细胞培养一段时间后加入CCK8试剂，继续培养一段时间，等颜色发生明显变化后，用酶标仪进行测定，以细胞数量为X轴，OD值为Y轴，就可以做成一条标准曲线。16、BrdU法和CCK8法有何区别？CCK8法是通过检测对数生长期的细胞内的脱氢酶来反映
01实验分组（每组建议3-6个复孔）实验组：药物或者基因过表达等处理细胞+CCK-8试剂（见下表黄色列）对照组：不加药物等的对照细胞+CCK-8试剂（见下表绿色列）空白组：不加细胞的空白培养基+CCK-8试剂（见下表蓝色列）PBS孔：灰色，防止液体过度蒸发排版参考：02实验方案 1.种板细胞数：细胞增殖实验：每孔加...
另外 WST 和 WST-8 甲臜都属于高度水溶性组分,反应结束更换新的培养液,即可清除外源组分。因为 CCK-8 是基于 WST-8 能够被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色甲臜产物(Formazan)的原理研制开发的,因而不会对细胞进行染色。 Q:培养基的本底颜色如酚红会不会影响细胞活性的检测呢?
吸液和加液时注意吸头及孔壁上残留；2. 每孔添加CCK-8的量不均匀：可以在加样前用培养基稀释CCK-8试剂并混匀后加样以减吸头及孔壁上残留；3. 检测前孔内液体浓度不均匀：检测前用手掌轻拍孔板侧边，使液体浓度更均匀；4. 边缘效应：96孔板最外圈溶液容易蒸发，导致重复性差，一般最外圈加PBS或者培养基，不...
CCK-8细胞检测方法的分析流程一般包括预处理、处理组与对照组的设置、CCK-8试剂的加入、孵育和吸光度测定等步骤。 1 预处理 将待测细胞接种于培养皿中,培养至适当的细胞数目。预处理包括适当的细胞培养条件、培养基的选择和培养时间的控制 2 处理组与对照组的设置 根据实验设计,将细胞分为处理组和对照组。处理组...
1.根据具体细胞类型确定其在 96 孔板种植密度,以对照组细胞密度至检测时达到 70%-90% 为参照,每组设置 3-6 个复孔,孔板边缘空不用,加入与培养基等体积的无菌 PBS 溶液。 2.每孔加入培养基体积 1/10 的CCK-8 溶液。若起始的培养体积为 200 微升,则需加入...
A（加药）：具有细胞、CCK-8溶液和药物溶液的孔的吸光度 A（空白）：具有培养基和CCK-8溶液而没有细胞的孔的吸光度 A（0加药）：具有细胞、CCK-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度 *细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力 三、存在的各种疑问：1、一个孔中应接种多少个细胞？当使用标准96孔板时，贴壁细胞的最...
预培养：将含有细胞的96孔板放入37℃、5% CO2的培养箱中预培养，直至细胞附着或达到实验所需的生长状态。对于悬浮细胞，这个步骤可以省略。加入CCK-8试剂：每孔加入10μl的CCK-8溶液。为了避免CCK-8试剂粘附在孔壁上，可以在加入试剂后轻轻晃动培养板或直接配置含10% CCK-8的培养基以换液的形式加入。孵育：将加...
③药物颜色的影响：药物本身的颜色可能与CCK-8反应后生成的橙黄色甲瓒产物颜色相近或产生叠加效应，从而干扰了吸光度的准确测定。另外pH变化会导致溶液中的酚红变色，影响OD值的检测。这些干扰可能使得不同组的差异较小。优化方法 ①药物预处理：在加入CCK-8之前，更换新鲜培养基以去除药物对CCK-8测定可能产生的影响。
3、37℃培养箱中培养:细胞接种后贴壁大约需要培养4小时,如果不需要贴壁,这步可以省去。 4、加入10ul CCK8:由于每孔加入CCK8量比较少,有可能因试剂沾在孔壁上而带来误差,建议将枪头浸入培养液中加入且在加完试剂后轻轻敲击培养板以帮助混匀。或者直接配置含10%CCK8的培养基(现用现配),以换液的形式加入。