细胞毒性实验：每孔加入约5000～10000个细胞，100μl培养基（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。孔板周围加100μL PBS防止过度蒸发。2.检测方法在对应的检测时间点，从培养箱取出细胞，每孔加入10μL的CCK-8试剂，避光反映1-4h（具体孵育时间根据细胞数决定，一般OD值在0....
适用范围广:CCK-8细胞检测方法适用于多种细胞类型和细胞系,包括哺乳动物细胞、原代细胞和肿瘤细胞等。它可以用于评估细胞增殖、细胞毒性和药物筛选等多个方面。 CCK-8细胞检测法同时存在一些不足: 细胞毒性:CCK-8试剂本身具有一定的细胞毒性,特别是在高浓度下使用时,可能会对细胞的正常生理状态产生影响。因此,在使用...
该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。 02.实验流程 1、将处理过的细胞胰酶消化后计数,接种1000个细胞至96孔板,每孔100μl培养基,将培养板置37℃,5%CO₂培养箱中培养0 h、24h、48h和72h;2、每孔加入10μlCCK-8溶液,用加了相...
1、细胞悬液加入96孔板前,应充分混匀,以免每孔加入细胞量不相等; 2、96 孔板周围一圈液体容易蒸发,应当加入等量的PBS 或培养基,以缓解蒸发; 3、CCK-8 的培养时间一般为1~4h,重复实验必须保证相同培养时间; 4、CCK-8试剂颜色与培养基颜色几乎相同,必须集中注意力加入,以免漏加; 5、酶标仪检测吸光度时,震荡...
CCK-8是一种高灵敏度、无放射性的比色检测法,用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数量,可替代传统的MTT法,常应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验等。尽管有人戏称CCK-8测细胞增殖实验只要有试剂盒就“有手就行”,但实际操作中仍有许多细节需要注意。本期细胞学堂将详细介绍CCK-8法的原理、...
细胞毒性实验:每孔加入约5000～10000个细胞,100μl培养基(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。孔板周围加100μL PBS防止过度蒸发。 2.检测方法 在对应的检测时间点,从培养箱取出细胞,每孔加入10μL的CCK-8试剂,避光反映1-4h(具体孵育时间根据细胞数决定,一般OD值在0.8-1.5...
细胞增殖检测 预培养细胞:将培养板置于培养箱中(37℃,5% CO2)预培养12-24小时,使细胞达到指数期。 加入CCK-8:每孔加入10ul CCK-8试剂。 继续培养:将培养板返回培养箱内继续培养0.5-4小时。 检测吸光度:使用酶标仪检测450nm波长的吸光度(OD值)。实验重复3次,取平均值作为最终结果。 细胞毒性检测 ...
CCK-8，即Cell Counting Kit-8，是细胞增殖与毒性检测中常用的方法。其核心成分是WST-8，一种2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐。WST-8与MTT相似，但性能更优。在电子耦合试剂（即细胞活性、呼吸和能量代谢存在的情况下），WST-8能被NAD+氧化，进而生成水溶...
一、CCK8检测细胞增殖/毒性的原理 Cell Counting Kit-8(简称CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS...
🔬 细胞增殖分析 制备细胞悬液:首先进行细胞计数,确保细胞数量准确。 接种到96孔板:根据实验需求,每孔加入约100ul的细胞悬液,细胞数量大约在1-2×10^4之间,每个样本可重复4-6次。 培养细胞:将96孔板放入37℃的培养箱中,细胞接种后大约需要4小时贴壁。如果不需要贴壁,可以跳过这一步。