一、Western blot 分析Procaspase-3的活化,以及活化的Caspase-3及对底物多聚(ADP-核糖)聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]等的裂解。 1. 方法 收集细胞→PBS洗涤→抽提细胞裂解液→蛋白定量→SDS-PAGE电泳→硝酸纤维素膜或PVDF膜转移→5%脱脂奶粉封闭,室温1.5~2 h或4°C过夜→Caspase-3多抗或单抗室温反应...
Caspase-3是一种半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶,在细胞凋亡过程中起到关键作用,被广泛用作凋亡的生物标志物。Caspase-3在凋亡过程中,被剪切成分子量分别为17kDa(p17)和12kDa(p12)的两个片段,并易位至细胞核。Caspase-3经过剪切激活后,可以激活 caspase-6、-7 和 -9,形成
(3)Caspase—3是细胞内促凋亡蛋白, M_(C1)-1 是Caspase—3基因表达的调控因子。为研究 BEZ和VLB治疗肾癌的机制,研究人员对各组细胞进行实验处理24小时后,检测Mcl-1的mRNA和蛋白质含量,结果如图2。对照VLBVLB+BEZBEZVLBM_(Cl)-1对照VLB+BEZBEZMcl-1GAPDHGAPDHmRNA含量蛋白质含量注:GAPDH作为内参,排除实验...
研究表明慢肝养阴胶囊对大鼠四氯化碳肝损害具有保护作用,对于抗结核药物所致肝损害具有良好的预防作用。本研究通过实验观察慢肝养阴胶囊对酒精性肝炎大鼠模型的影响,为慢肝养阴胶囊在临床上用于治疗酒精性肝炎提供实验研究基础。 // 引用本文...
1、Caspase-3的活性检测可以判断细胞凋亡情况 Caspase-3经过细胞外途径和细胞内途径来介导细胞凋亡,细胞外途径或称为死亡受体途径,细胞内途径或称为线粒体途径。Caspase-3活性检测和表达在生物实验服务中,常作为细胞凋亡检测的方法。在细胞凋亡实验中检测Caspase-3活性的方法主要有Western blot分析、荧光分光光度计分析...
四、Caspase-3活性测定: 建议正式实验选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验 样本和试剂浪费! 1、样本制备: ① 组织样本: 取约0.1g组织,加入1mL提取液,进行冰浴匀浆。4℃×12000rpm离心10min,取上 清,置冰上待测。 【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1...
硕士学位论文 凋亡蛋白Caspase- 3 mRNA在犬脑 皮质深低温停循环过程中表达的实验研究 硕士研究生茹江江 指导老师邹小明副教授 摘要 深低温停循环( Deep hypot hermi c ci rcul at ory arrest ,DHCA) 可以提 供一个无血而宁静的手术环境,是主动脉弓部病变及部分婴幼儿先天性心脏畸 形矫治手术中脑保护的关键技...
文章编号:100025404(2004)1321245203 论著Caspase23在缺血再灌注大鼠脑海马神经元凋亡中作用的实验研究尹昌林,熊健琼,文亮 (第三军医大学西南医院急救部,重庆400038) 提要:目的 探讨一种在天冬氨酸残基后进行裂解的半胱氨酸蛋白酶caspase23(cysteinproteasecleavingafteranaspresidue,caspase23);在全脑缺血20min再灌注大鼠脑...
目的 观察大鼠在不同程度及不同时间脑挫伤后caspase-3表达的变化.方法 对48例实验性脑挫伤大鼠的脑组织进行检验,同时以10例非脑挫伤的脑组织做对照.结果 伤后1h,caspase-3即有表达;24～48h达高峰,2周时仍有阳性细胞存在.阳性细胞多集中于挫伤区及周围带皮质和脑实质内海马区;不同程度脑 挫伤组之间于伤后1h...
目的:研究caspase-3抑制剂(Z-DEVD-FMK)对肺缺血再灌注损伤细胞凋亡及相关蛋白的影响,并探索caspase-3抑制剂在肺移植中对供体肺的保护作用,为临床上肺移植保护提供实验依据. 方法:采用离体兔肺缺血再灌注模型,将32只健康新西兰大白兔随机平均分为2组,即对照组,实验组每组各16只.对照组用4℃低钾右旋糖苷(LPD)液...