Caspase-3是一种半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶,在细胞凋亡过程中起到关键作用,被广泛用作凋亡的生物标志物。Caspase-3在凋亡过程中,被剪切成分子量分别为17kDa(p17)和12kDa(p12)的两个片段,并易位至细胞核。Caspase-3经过剪切激活后,可以激活 caspase-6、-7 和 -9,形成凋亡级联反应。Caspase-3参与了亨廷顿蛋白的...
Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase-3的活性明显下降。 实验材料 细胞 试剂、试剂盒 Ac-DEVD-AMC磷酸缓冲液蒸馏水脱脂奶粉Ca...
1、不同细胞在凋亡早期均出现Caspase-3蛋白高表达,本法具有普遍意义;2、在蛋白酶级联切割过程中,Caspase-3处于核心位置;3、可用于各种培养细胞、组织的凋亡诱导研究,且灵敏度高,特异性强,与其他已知Caspases无交叉反应;4、操作简单,易于上手,节省实验时间;5、检测方式多样,多种选择方式。Caspase-3活性检测...
我们建议客户在检测到 procaspase-3 的前提下,做时间和浓度梯度预实验,以确定您的药物对您的细胞系的最佳诱导 caspase-3 活化的条件。CST 通常用 staurosporine #9953(1μM for 3hours)或 etoposide #2200(25μM for 5 hours)处理 HeLa,NIH/3T3 或 C6 cells 作为 cleaved caspase-3 的阳性参照。更多靶点的...
划重点,Caspase-3 检测 7 大要点: 1. 合理的凋亡诱导处理方式:设置药物诱导时间和浓度梯度预实验,以确定特定细胞系中药物诱导 caspase-3 活化的最佳条件,并用 staurosporine #9953(1μM for 3hours)或 etoposide #2200(25μM for 5 hours)处理 HeL...
细胞凋亡检测实验-Caspase-3活性检测法Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应...
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中胱天蛋白酶-3(caspase-3)的活性。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胱天蛋白酶-3(caspase-3)水平。用纯化的人胱天蛋白酶-3(caspase-3)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胱天蛋白酶-3(caspase-...
实验:蛋白质免疫印迹检测Caspase-3的活化预习报告 (北医综合实验)一、Western Blot实验原理 Western Blot (蛋白质免疫印迹法)是将经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维索薄膜——NC膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肤类型及其生物学活性不变。然后以...
二、百萤Amplite 荧光法Caspase 3/7活性检测试剂盒实验方案 概述 用测试化合物(100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板) 制备细胞体积的半胱天冬酶3/7测定溶液 在室温下孵育1小时 在Ex / Em = 535 / 620nm处监测荧光强度 操作方法 1.准备细胞: 1.1对于粘附细胞:在生长培养基中将细胞在20,000至80,000个细胞/...
Caspase-3活性荧光检测试剂盒实验设空白对照孔和待测样品孔均加入含荧光底物acdevdamc勺caspase3反应缓冲液反应缓冲液使用前加入reagent11孔正常细胞裂解液含cocktail待测样品孔加10胞总蛋白总量50加入样品后立即使用polarstar荧光分光光度计检测amc释放量分析荧光强度激发光波长380nm发射光波长为460nm每10分钟测定一次...